Polski

Pall eBDS REF: 400-03E

ZESTAW TESTOWY PALL eBDS System wykrywaj◊cy bakterie przeznaczony do badania preparatów p∆ytkowych oraz ubogoleukocytarnych preparatów krwinek czerwonych. Do diagnostyki In-Vitro. NIE U¯YWAÆ DO TRANSFUZJI.

Better Blood, Better Care.SM

Polski 9. Otwórz zacisk pozwalaj◊c by wp∆ywaj◊cy p∆yn osi◊gn◊∆ poziom pomiêdzy liniami prawid∆owego nape∆niania umieszczonymi na pojemniku zestawu. (Pojemnik jest „niedostatecznie wype∆niony” gdy poziom p∆ynu jest poni¿ej pierwszej linii, jest „przepe∆niony” gdy poziom p∆ynu jest powy¿ej drugiej linii.) Przepe∆nienie worka mo¿e daæ wynik fa∆szywie pozytywny. Niedostateczne wype∆nienie mo¿e daæ wynik fa∆szywie negatywny. 10. Zaciœnij dren. 11. Zgrzej dreny z obu stron zaworu kontrolnego*. Uwaga: W pojemniku z preparatem krwiopochodnym nale¿y pozostawiæ ok. 10-15 cm drenów. Uwaga: W przypadku analizy krwinek p∆ytkowych zawieszonych w roztworze PAS lub preparatu krwinek czerwonych, nale¿y wprowadziæ do bazy danych Pall Data numer donacji, kod produktu oraz informacje dotycz◊ce numeru serii pojemnika eBDS. 12. Od∆◊cz zawór kontrolny od pojemnika na próbkê I od pojemnika na preparat krwiopochodny I wyrzuæ zawór kontrolny*. Uwaga: Elementy morfotyczne krwi mo¿na odzyskaæ roluj◊c zawartoœæ drenów w kierunku pojemnika zawieraj◊cego preparat krwiopochodny. 13. Proszê umieœciæ pojemnik na próbki na poziomej wytrz◊sarce p∆ytek krwi, w inkubatorze, w którym temperatura wynosi 35°C, odpowiednie interwa∆y przechowywania i inkubacji znajduj◊ siê w tabeli poni¿ej. Proszê ustawiæ pojemnik na preparat krwiopochodny w taki sposób, aby ruch wytrz◊sarki skierowany by∆ wzd∆u¿ d∆ugiej osi pojemnika na próbkê. Nale¿y upewniæ siê, ¿e pojemnik skierowany jest naklejk◊ ku górze. 14. Zwróæ pojemnik z produktem krwiopochodnym do przechowania. 15. Zmierz odsetek zawartoœci tlenu w górnej czêœci pojemnika na próbki, w czasie okreœlonego okresu inkubacji w temperaturze 35°C (zob. tabela poni¿ej).

ZESTAW TESTOWY PALL eBDS System wykrywaj◊cy bakterie przeznaczony do badania preparatów p∆ytkowych oraz ubogoleukocytarnych preparatów krwinek czerwonych Do diagnostyki In-Vitro NIE U¯YWAÆ DO TRANSFUZJI (Nr ponownego zamówienia: 400-03E) PRZEZNACZENIE Zestaw Próbek Pall eBDS jest przeznaczony do stosowania w analizatorze tlenu Pall eBDS w jakoœciowych procedurach odzysku i wykrywania mikroorganizmów (bakterii) tlenowych i fakultatywnych beztlenowych w badaniu kontroli jakoœci preparatów p∆ytek uzyskanych metod◊ aferezy i pochodz◊cych z krwi pe∆nej umieszczonych w osoczu lub w roztworze dla p∆ytek [platelet additive solution] (PAS), oraz ubogoleukocytarnych preparatów krwinek czerwonych. Sterylna droga przep∆ywu. Sterylizowany promieniowaniem gamma. STRESZCZENIE I WYJAŒNIENIE Zestaw Próbek Pall eBDS jest stosowany do okreœlania, czy zazwyczaj ja∆owe ubogoleukocytarne oraz zawieraj◊ce nie redukowan◊ liczbê leukocytów preparaty p∆ytkowe oraz ubogoleukocytarne preparaty krwinek czerwonych zawieraj◊ bakterie. Gdy przeprowadzano pomiar iloœci bakterii w preparatach p∆ytkowych, wykorzystywano g∆ównie klasyczne metody mikrobiologiczne. Wykorzystanie markerów wzrostu bakteryjnego, takich jak pH i stê¿enie glukozy, poddawano badaniu, ale wykazywano brak czu∆oœci i swoistoœci.1,2,3,4 Zestaw Próbek eBDS wykorzystuje stê¿enie tlenu jako marker wzrostu bakteryjnego. Dziêki zastosowaniu ja∆owego urz◊dzenia ∆◊cz◊cego, Zestaw Próbek eBDS daje funkcjonalnie zamkniêty system do pobierania próbek i nie wymaga dodatkowych odczynników. System wymaga zastosowania analizatora tlenu Pall eBDS do pomiaru odsetka tlenu w pojemniku na próbki, po poddaniu próbki preparatu krwi znajduj◊cej siê w pojemniku na próbki, inkubacji w temperaturze 35°C. SPOSÓB PRZEPROWADZENIA TESTU Metoda wykrywania opiera siê na pomiarze zawartoœci tlenu w powietrzu znajduj◊cym siê w pojemniku zawieraj◊cym próbkê, bêd◊cym wskaŸnikiem obecnoœci bakterii. Do pomiaru odsetka tlenu w górnej czêœci pojemnika zawieraj◊cego próbkê System Pall eBDS wykorzystuje analizator tlenu Pall eBDS.W przypadku, gdy w pobranej próbce preparatu krwiopochodnego znajduj◊ siê bakterie, zu¿ycie tlenu wzrasta, z uwagi na aktywnoœæ metaboliczn◊ oraz proliferacjê bakterii w czasie inkubacji. Procesy te prowadz◊ do mierzalnego obni¿enia zawartoœci tlenu w próbce, jak równie¿ w powietrzu znajduj◊cym siê w pojemniku na próbkê. ODCZYNNIKI Pojemnik zestawu zawiera dwie tabletki, ka¿da o zawartoœci 1,75 mg polianetosulfonianu sodu (SPS), po¿ywkê bulionow◊, chlorek wapnia i substancje pomocnicze. Nie wymaga mieszania lub rozcieñczania. WARUNKI PRZECHOWYWANIWA Przechowywaæ w temperaturze nie przekraczaj◊cej 40oC. Nie zamra¿aæ. Nie u¿ywaæ jeœli opakowanie jest uszkodzone lub kapturki ochronne s◊ przemieszczone lub ich brak. Nie u¿ywaæ jeœli stwierdza siê uszkodzenie zestawu do testowania eBDS lub gdy pojemnik testowy nie zawiera dwóch tabletek. Nie stosowaæ po up∆ywie terminu wa¿noœci. Po otwarciu opakowania jego zawartoœæ powinna byæ wykorzystana w ci◊gu 14 dni. OOSTRZE¯ENIE Do diagnostyki In-Vitro. NIE U¯YWAÆ DO TRANSFUZJI. INSTRUKCJA OBS£UGI Materia∆y wymagane, ale nie dostarczone: 35°C Inkubator z wytrz◊sark◊ krwinek Sterylne z∆◊cza Zgrzewarka drenów Roller drenów Zacisk lub kleszczyki hemostatyczne Pobranie i przygotowanie próbki Uwaga: Przy badaniu próbek p∆ytek krwi zawieszonych w p∆ynie konserwuj◊cym PAS nale¿y sprawdziæ czy program Pall Data i Analizator Tlenu Pall eBDS zosta∆y odpowiednio skonfigurowane. 1. Dla uzyskania optymalnego wyniku test powinno siê przeprowadzaæ co najmniej 24 godziny po zbiórce materia∆u. W celu zapewnienia optymalnych warunków wykrycia bakterii w preparatach krwinek czerwonych, próbki nale¿y poddaæ analizie po up∆ywie 24 godzin od pobrania. Wykonanie testu przed okreœlonym powy¿ej czasem mo¿e spowodowaæ nie wykrycie drobnoustrojów wolno-namna¿aj◊cych siê. 2. Po up∆ywie wymaganego czasu wyjmij preparat krwinek z miejsca przechowywania i przygotuj próbkê jak opisano poni¿ej. 3. Zaciœnij dren zestawu poni¿ej zaworu z zastawk◊. 4. Sk∆adniki p∆ytkowe: Delikatnie wymieszaæ preparat p∆ytkowy i zdemontowaæ przewody worka zawieraj◊cego preparat p∆ytkowy. Preparaty krwinek czerwonych: wymieszaj, obracaj◊c oba koñce oko∆o dziesiêæ razy i zroluj dren a¿ do ja∆owego po∆◊czenia z zestawem testowym eBDS. SprawdŸ czy dren jest wype∆niony wymieszan◊ reprezentatywn◊ próbk◊. 5. W warunkach sterylnych po∆◊cz worek z krwinkami z eBDS zestawem testowym zgodnie ze wskazówkami producenta. Po pod∆◊czeniu drenu zestawu testowego do torby z krwinkami p∆ytkowymi, w∆ó¿ korek drenu w wy¿∆obienie sterylnego ∆◊cznika. 6. Umieœæ nalepkê zawieraj◊ca numer jednostki w odpowiednim miejscu na pojemniku zestawu. 7. Delikatni wymieszaj pojemnik z produktem krwiopochodnym. 8. Zawieœ lub trzymaj worek z preparatem krwinek p∆ytkowych powy¿ej pojemnika zestawu tak, aby linie prawid∆owego nape∆nienia by∆y w po∆o¿eniu poziomym (uwaga: port zestawu powinien byæ skierowany w dó∆).

Sk∆adnik

Minimalny okres inkubacji przed pobraniem materia∆u do analizy za pomoc◊ systemu eBDS/warunki zapewniaj◊ce optymaln◊ czu∆oœæ metody

P∆ytki krwi zawieszone w osoczu

24 godziny w temperaturze 22ºC±2ºC

18-30 godzin

P∆ytki krwi zawieszone w PAS

24 godziny w temperaturze 22ºC±2ºC

24-48 godzin

Krwinki czerwone

24 godziny w temperaturze 4ºC±2ºC

48-72 godzin

Czas inkubacji pojemników eBDS w temperaturze 35ºC

Oznaczanie próbki (za pomoc◊ Analizatora tlenu Pall eBDS) 16. SprawdŸ czy Analizator tlenu eBDS jest gotowy do pomiaru próbki. 17. Po umieszczeniu pojemnika testowego na stojaku w pozycji pionowej, wprowadŸ sondê analizatora tlenu poprzez sterylny port i membranê do górnej warstwy gazu znajduj◊cego siê w pojemniku testowym. Uwagi: • Nie uciskaj pojemnika testowego podczas wprowadzania sondy, ucisk mo¿e spowodowaæ wp∆yniecie p∆ynu do sondy. • Nie wprowadzaj sondy do p∆ynu w worku testowym. • Nie u¿ywaj alkoholu do czyszczenia portu zestawu. Alkohol mo¿e zak∆ócaæ proces analizy. 18. Zmierz zawartoœæ tlenu, poprzez pobranie górnej warstwy powietrza z pojemnika testowego zgodnie z instrukcjami obs∆ugi Analizatora. (Zobacz "Procedura testowania" w Instrukcji Obs∆ugi Analizatora tlenu Pall eBDS). 19. Pojawienie siê napisu „Pass" wskazuje, ¿e nie stwierdzono bakterii w próbce, wiec test jest NEGATYWNY w momencie dokonywania pomiaru stê¿enia tlenu. Zapisz wynik i wyrzuæ pojemnik testowy eBDS*. 20. A Napis „FAIL" wskazuje, ¿e zawartoœæ tlenu jest ni¿sza od dopuszczalnych norm. 21. Jeœli pojawi siê napis „FAIL", oznacza to, ¿e istnieje du¿e prawdopodobieñstwo ska¿enia próbki bakteriami. Przed utylizacj◊ preparatu krwiopochodnego zaleca siê wykonanie posiewu, w celu potwierdzenia wyniku*. 22. Je¿eli zosta∆ wyœwietlony komunikat alarmowy, by powtórzyæ test, postêpuj zgodnie z instrukcjami wyœwietlanymi na ekranie Analizatora tlenu Pall eBDS. W badanej próbce mo¿e byæ wykonany tylko jeden powtórny test zawartoœci procentowej tlenu w danym pojemniku na próbki eBDS. Je¿eli chcesz wykonaæ powtórny test przejdŸ do punktu 16. 23. W przypadku, gdy konieczne jest przeprowadzenie dodatkowego badania preparatu krwiopochodnego, nale¿y przymocowaæ nowy pojemnik testowy eBDS i postêpowaæ pocz◊wszy od 2. etapu, opisanego powy¿ej. INTERPRETACJA WYNIKÓW Oprogramowanie Analizatora tlenu Pall eBDS okreœla wyniki badania. Wynik pozytywny wskazuje na potencjalne zaka¿enie próbki drobnoustrojami i jest wyœwietlany jako „FAIL”. Wynik negatywny jest wyœwietlany jako „Pass”. Je¿eli na wyœwietlaczu pojawi siê komunikat o b∆êdzie lub s◊ jakiekolwiek inne przes∆anki, ¿e wynik testu „Pass” lub „Fail” jest nieprawid∆owy, wynik testu nale¿y uznaæ, za nieprawid∆owy. OCZEKIWANE WARTOŒCI Przyjmuje siê, ¿e >99% wszystkich badanych próbek jest wolnych od bakterii lub zawiera ich minimaln◊ iloœæ. W takim przypadku, w czasie dokonywania pomiaru stê¿enia tlenu akceptowany poziom zawartoœci tlenu jest potwierdzony napisem „Pass” na wyœwietlaczu. Wynik analizy próbek, w których zawartoœæ tlenu jest ni¿sza od przyjêtych norm bêdzie pozytywny, a na wyœwietlaczu pojawi siê napis „FAIL”. CHARAKTERYSTYKI WYDAJNOŒCI W przypadku badania w analizatorze tlenu Pall eBDS, Zestaw Próbek Pall eBDS pozwala na odzysk i wykrycie bakterii tlenowych i fakultatywnych beztlenowych w preparatach p∆ytkowych i ubogoleukocytarnych preparatach krwinek czerwonych.

1

Polski najmniej 5 badañ dotycz◊cych wszystkich 12 szczepów bakteryjnych. Ponadto, przy pomocy Pall eBDS przebadano w sumie 633 nie inokulowane próbki preparatów krwinek czerwonych. Jak przedstawiono w tabelach od 3 do 7, zastosowanie Pall eBDS pozwoli∆o na wykrycie tlenowych i fakultatywnie beztlenowych bakterii w próbkach preparatów krwinek czerwonych, o docelowym stê¿eniu bakterii od 1-15 CFU/ml lub wy¿szym. Wykrywalnoœæ wynios∆a 100% w przypadku próbek pobranych w czasie 0, po 24 godzinach, 7, 21, 35 lub po 42 dniach od inokulacji oraz po 48 godzinnej inkubacji wszystkich badanych próbek. W ¿adnej z 633 próbek kontrolnych, w których nie dokonano inokulacji nie stwierdzono pozytywnego wyniku w czasie badania za pomoc◊ Pall eBDS. ŒRODKI OSTRO¯NOŒCI I OGRANICZENIA PROCEDURY 1. Zestaw Próbek Pall eBDS zosta∆ zaprojektowany do wykrywania ska¿enia bakteryjnego preparatów p∆ytkowych i ubogoleukocytarnych preparatów krwinek czerwonych. U¿ytkownicy musz◊ byæ œwiadomi7, ¿e stosowne bakterie rosn◊ bardzo powoli, i jeœli pocz◊tkowy poziom ska¿enia takimi bakteriami jest bardzo niski, podwielokrotnoœci pobrane do badania eBDS mog◊ nie zawieraæ bakterii. W takich przypadkach bakterie nie zostan◊ wykryte i zostanie wykazany wynik ujemny ("dopuszczono"). D∆u¿szy czas przechowywania preparatów krwi przed pobraniem próbek prawdopodobnie poprawi zdolnoœæ wykrywania tych wolno rosn◊cych organizmów. 2. Badania zestawu próbek eBDS zosta∆y przeprowadzone z wykorzystaniem preparatów p∆ytkowych CP2D i ACD-A. Badania PAS zosta∆y przeprowadzone z zastosowaniem 20-30% osocza CPD i 70-80% PASII (T-Sol). Badania krwinek czerwonych zosta∆y przeprowadzone z wykorzystaniem standardowych sk∆adników CPD/SAGM lub CP2D/AS-3. 3. Urz◊dzenie by∆o testowane na szczepach bakterii wymienionych poni¿ej. Bakterie mog◊ zostaæ nie wykryte, je¿eli nie namna¿aj◊ siê dostatecznie w preparatach p∆ytek lub w pojemniku testowym lub te¿, je¿eli nie wymagaj◊ tlenu do wzrostu. 4. Przerwanie wytrz◊sania próbek podczas inkubacji mo¿e daæ wynik fa∆szywie negatywny. 5. Wykresy dotycz◊ce czu∆oœci I swoistoœci powsta∆y na podstawie wyników uzyskanych w naszym oœrodku, oraz w innych oœrodkach, w których wykorzystano preparaty krwinek p∆ytkowych pobrane od ró¿nych dawców oraz pochodz◊ce z aferezy, celowo zaka¿one niewielk◊ iloœci◊ bakterii (dawka docelowa 1-15 CFU/ml), z których pobierano próbki natychmiast lub po up∆ywie 24 godzin, a nastêpnie analizowane za pomoc◊ zestawu testowania eBDS pod k◊tem odsetka zawartoœci tlenu po 24 do 30 godzinach inkubacji w temperaturze 35ºC. Podobne badania przeprowadzono z u¿yciem preparatów krwinek czerwonych, przechowywanych przez 24 godziny i badanych za pomoc◊ zestawu testów eBDS, pod k◊tem zawartoœci tlenu 48-72 godzinnej inkubacji w temperaturze 35ºC. Przed∆u¿enie czasów przechowywania przed pobraniem próbki mo¿e zwiêkszyæ czu∆oœæ badania. W czasie stosowania mog◊ wyst◊piæ wahania podanych wartoœci statystycznych. UWAGA: Nieprawid∆owe rozpuszczenie tabletek w p∆ynie mo¿e spowodowaæ uzyskanie fa∆szywie dodatniego wyniku. 6. Wynik negatywny („Pass”)nie oznacza, ¿e testowany preparat jest sterylny. Negatywny wynik mo¿e byæ spowodowany przez wiele czynników takich jak na przyk∆ad nie sterylne pobranie próbki do zestawu testowego eBDS lub brak drobnoustrojów w próbce zebranej w pojemniku testowym. 7. Przepe∆nienie pojemnika testowego mo¿e daæ wynik fa∆szywie pozytywny [Pojemnik testowy uwa¿a siê za “przepe∆niony” gdy jest wype∆niony do poziomu powy¿ej drugiej linii prawid∆owego nape∆niania. Pojemnik testowy uwa¿a siê za “niedostatecznie wype∆niony” gdy poziom p∆ynu jest poni¿ej poziomu pierwszej linii prawid∆owego nape∆niania.] 8. Zawieraj◊ce nie redukowan◊ liczbê leukocytów preparaty krwinek czerwonych, lub p∆ytek zawieraj◊ce patologicznie wysok◊ liczb◊ p∆ytek (>3,0 x 109 na ml) mog◊ daæ fa∆szywie dodatnie wyniki. 9. Alkohol mo¿e zak∆ócaæ proces analizy i nie powinien byæ u¿ywany do czyszczenia portu zestawu, przed wprowadzeniem sondy analizatora tlenu. 10. Nale¿y u¿yæ sterylnej zgrzewarki zgodnie z zaleceniami producenta; by system zachowa∆ szczelnoœæ nale¿y u¿ywaæ zgrzewarki odpowiedniej do u¿ytych drenów. Wymiary i budowa drenu zestawu testowego eBDS warunkuj◊ zastosowanie odpowiedniego typu zgrzewarki. * W czasie obróbki nale¿y zwróciæ uwagê na nastêpuj◊ce œrodki ostro¿noœci: 1. Dreny nale¿y zgrzewaæ w taki sposób, aby nie dopuœciæ do rozlewania siê p∆ynu. 2. Produkty ska¿one krwi◊ nale¿y usuwaæ zgodnie z odpowiednimi przepisami dotycz◊cymi MATERIA£ÓW ZAKA∑NYCH. BIBLIOGRAFIA 1. Mitchell KT and Brecher ME: Approaches to the detection of bacterial contamination in cellular blood products. Transfusion Medicine Reviews 1999;13:132-144. 2. Wagner SJ, Robinette D: Evaluation of swirling, pH, and glucose tests for the detection of bacterial contamination in platelet concentrates. Transfusion 1996;36:989-993. 3. Brecher ME, Boothe G, Kerr A: The use of chemiluminescence-linked universal bacterial ribosomal RNA gene probe and blood gas analysis for the rapid detection of bacterial contamination in white cell-reduced and non reduced platelets. Transfusion 1993; 33:450-457. 4. Burstain JM, Brecher ME, Workman, et al: Rapid identification of bacterially contaminated platelets using reagent strips: glucose and pH analysis as markers of bacterial metabolism. Transfusion 1997;37:255-258. 5. Brecher ME: Bacterial contamination of blood products. Simon T, Dzik WH, Snyder E, Stowell CP and Strauss RG. Principles of Transfusion Medicine, 3rd edition. Lippincott Williams & Wilkins; 2002; 789-801. 6. Brecher ME, Hay S. Bacterial contamination of blood components. Clinical Microbiology Reviews 2005; Jan. 18(1):195-204. 7. Brecher ME, et al. Growth of bacteria in inoculated platelets: implications for bacteria detection and the extension of platelet storage. Transfusion 2000; 40:1308-1312.

P∆ytki krwi Ocena Zestawu Próbek Pall eBDS obejmuje badanie ubogoleukocytarnych i zawieraj◊cych nie redukowan◊ liczbê leukocytów jednostek preparatów p∆ytkowych, w których zasiano jedn◊ z 10 bakterii podawanych jako przyczyna 98% zgonów z powodu bakteryjnego ska¿enia koncentratów p∆ytkowych (PC) w okresie od 1976 roku do 19885 roku. Podsumowuj◊c, badania te wykaza∆y, ¿e wykrywanie na poziomie 100% uzyskano w badaniach 280 jednostek ubogoleukocytarnych preparatów p∆ytkowych ska¿onych nisk◊ zawartoœci◊ bakterii oraz w testach za pomoc◊ Pall eBDS po 24 godzinach przechowywania. Badanie te równie¿ wykaza∆y, ¿e wykrywanie na poziomie 100% uzyskano testuj◊c 189 zawieraj◊cych nie redukowan◊ liczbê leukocytów jednostek preparatów p∆ytkowych, ska¿onych nisk◊ zawartoœci◊ bakterii oraz po pobraniu próbek do Zestawu Próbek Pall eBDS po 24 godzinach przechowywania. W skrócie, badania oceniaj◊ce zosta∆y przeprowadzone w nastêpuj◊cy sposób: ubogoleukocytarne PC uzyskane za pomoc◊ aferezy lub preparaty pe∆nej krwi pochodz◊ce od losowych dawców zosta∆y poddane posiewowi z zastosowaniem wynosz◊cej 1-15 CFU/ml docelowej dawki ka¿dego z dziesiêciu mikroorganizmów, o których wiadomo, ¿e maj◊ zwi◊zek z infekcjami przenoszonymi przez przetoczenie preparatów p∆ytkowych (patrz Tabela 1 poni¿ej). Niezw∆ocznie po wymieszaniu, w próbce oznaczano poziom bakterii w PC (Tabela 1). Po 24 godzinach przechowywania PC po wykonaniu posiewu, pobrano nastêpn◊ próbkê, aby okreœliæ poziom 24-godzinnego wzrostu (Tabela 1), oraz pobrano podwielokrotnoœæ do pojemnika na próbki eBDS i poddano inkubacji przez 24 godziny w temperaturze 35oC z zastosowaniem poruszania za pomoc◊ shakera horyzontalnego. W badaniu uczestniczy∆y cztery oœrodki badawcze, spoœród których 2 oœrodki bada∆y p∆ytki otrzymane za pomoc◊ aferezy, a 2 pozosta∆e oœrodki bada∆y p∆ytki pochodz◊ce z pe∆nej krwi. Ka¿dy oœrodek przeprowadzi∆ co najmniej 5 powtórzonych badañ w stosunku do ka¿dego z dziesiêciu organizmów. W przypadku PAS, nastêpne trzy oœrodki badawcze przeprowadzi∆y badania p∆ytek otrzymanych za pomoc◊ aferezy oraz pochodz◊cych z ko¿uszka leukocytarnop∆ytkowego [buffy coat] przechowywanych w PAS. PC pochodz◊ce z pe∆nej krwi zawieraj◊cej nie redukowan◊ liczbê leukocytów zosta∆y poddane posiewowi z zastosowaniem wynosz◊cej 1-15 CFU/ml docelowej dawki ka¿dego z dziesiêciu mikroorganizmów, o których wiadomo, ¿e maj◊ zwi◊zek z infekcjami przenoszonymi przez przetoczenie preparatów p∆ytkowych (patrz Tabela 1). Po 24 godzinach przechowywania PC po wykonaniu posiewu, pobierano nastêpn◊ próbkê, aby okreœliæ poziom 24-godzinnego wzrostu (Tabela 1), oraz pobrano podwielokrotnoœæ do pojemnika na próbki Pall eBDS i poddano inkubacji przez 24-30 godziny w temperaturze 35oC z zastosowaniem poruszania za pomoc◊ shakera horyzontalnego. W badaniu uczestniczy∆y trzy oœrodki badawcze, spoœród których 2 oœrodki prowadzi∆y badania za pomoc◊ CP2D, a jeden za pomoc◊ CPD. Ka¿dy oœrodek przeprowadzi∆ co najmniej 5 powtórzonych badañ w stosunku do ka¿dego z dziesiêciu organizmów. Ponadto, podwielokrotnoœci ubogoleukocytarnych i zawieraj◊cych nie redukowan◊ liczbê leukocytów PC zosta∆y równie¿ pobrane do pojemnika na próbki Pall eBDS po 24 godzinach po wykonaniu posiewu, a nastêpnie poddane inkubacji przez 18 godzien w temperaturze 35oC z zastosowaniem poruszania za pomoc◊ shakera horyzontalnego (Tabela 2). Podsumowuj◊c, badania te wykaza∆y, ¿e wykrywanie na poziomie 99,2% oraz 96% osi◊gniêto testuj◊c (odpowiednio) 247 ubogoleukocytarnych i 198 zawieraj◊cych nie redukowana liczbê leukocytów jednostek preparatów p∆ytkowych, umyœlnie ska¿onych nisk◊ zawartoœci◊ bakterii oraz przez pobranie próbek do badania za pomoc◊ Pall eBDS po 24 godzinach przechowywania, które nast◊pi∆o po 18 godzinach inkubacji worka. Poza tym, w piêciu kolejnych badaniach wszystkich z dziesiêciu drobnoustrojów, przed oznaczeniem zawartoœci procentowej tlenu, próbki poddawano inkubacji w temperaturze 35°C przez okres 24 a nastêpnie 30 godzin. Za pomoc◊ zestawu Pall eBDS przebadano równie¿ 226 nie zaka¿onych standardowych PC (24 otrzymane przez aferezê i 202 losowo wybrane preparaty p∆ytek). Jak przedstawiono w Tabeli 1 i 2, za pomoc◊ wykrywania bakterii tlenowych i fakultatywnych beztlenowych w preparatach p∆ytkowych, na które pozwala Pall eBDS, wykazuje siê bakterie na poziomie 1-15 CFU/ml i powy¿ej. W osoczu badanych za pomoc◊ Pall eBDS 914 jednostek ska¿onych preparatów p∆ytkowych, wyst◊pi∆o 10 niepowodzeñ w zakresie wykrywania (Tabela 2 przy inkubacji 18-godzinnej). W 2 jednostkach ubogoleukocytarnych posiano Enterobacter cloacae, a próbki zosta∆y pobrane po 24 godzinach i zastosowano wobec nich 18-godzinn◊ inkubacjê, natomiast w przypadku 8 jednostek zawieraj◊cych nie redukowan◊ liczbê leukocytów (w 4 jednostkach posiano Staphylococcus epidermidis, w 2 jednostkach posiano Klebsiella pneumoniae, w 1 jednostce posiano Pseudomonas aeruginosa i w 1 jednostce posiano Serratia marcescens), próbki zosta∆y pobrane po 24 godzinach i zastosowano wobec nich 18-godzinn◊ inkubacjê. Jednak, w ka¿dym z tych dziesiêciu przypadków uzyskano wynik dodatni po pobraniu próbek po 24 godzinach i zastosowaniu 24-godzinnej inkubacji (Tabela 1). Zatem, wykrywalnoœæ na poziomie 100% zosta∆a uzyskana w przypadku próbek zarówno preparatów p∆ytek uzyskanych metod◊ aferezy jak i z krwi pe∆nej pobranych po 24 godzinach po wykonaniu posiewu i po 24-godzinnej inkubacji w przypadku wszystkich badanych próbek. Podobnie, wykrywalnoœæ na poziomie 100% zosta∆a uzyskana po 30-godzinnej inkubacji. W koñcu, ¿adna spoœród 372 jednostek kontrolnych ni poddanych posiewom nie wykaza∆a wyniku dodatniego za pomoc◊ Pall eBDS. Krwinki czerwone Badania dotycz◊ce zestawu testów Pall eBDS obejmowa∆y indywidualne badanie próbek ubogoleukocytarnych preparatów krwinek czerwonych, inokulowanych jednym z 12 szczepów bakteryjnych, które by∆y przyczyn◊ 88% zgonów spowodowanych kontaminacj◊ bakteryjn◊ preparatów krwinek czerwonych, latach od 1976 do 1998.6 Badania przeprowadzono w nastêpuj◊cy sposób: Próbki ubogoleukocytarnych preparatów krwinek czerwonych, zawieszonych w CPD/SAGM lub CP2D/AS-3 inokulowane by∆y docelow◊ dawk◊ wynosz◊c◊ od 1-15 CFU/ml, zawieraj◊c◊ wszystkie dwanaœcie szczepów bakteryjnych zwi◊zanych z zaka¿eniami przenoszonymi w czasie przetoczenia (zob. tabela 3 poni¿ej). Natychmiast po wymieszaniu, pobierano próbkê, w celu oznaczenia stê¿enia bakterii w preparacie krwinek czerwonych (tabela 3). Po up∆ywie 24. godzinnego okresu przechowywania pobierano dodatkow◊ próbkê, w celu okreœlenia poziomu wzrostu po 24 godzinach (tabela 4), pobierano równie¿ próbkê o tej samej objêtoœci do pojemnika na próbki eBDS, któr◊ nastêpnie inkubowano w przez 48 godzin w temperaturze 35°C, wstrz◊saj◊c na poziomej wstrz◊sarce. Próbki pobierano równie¿, w celu okreœlenia poziomów wzrostu, po up∆ywie 7, 21 i 35 dni (w przypadku preparatów zawieraj◊cych erytrocyty zawieszone w CPD/SAGM) lub 42 dni (w przypadku preparatów zawieraj◊cych erytrocyty zawieszone w CP2D/AS-3) (tabela 5, 6 i 7). W badaniu uczestniczy∆y trzy oœrodki. W ka¿dym z oœrodków przeprowadzono co

a Pall jest zarejestrowanym znakiem handlowym Pall Corporation. Better Blood, Better Care. jest mark◊ serwisow◊ Pall Corporation. 147400034Z, wydano w lutym 2007 roku.

2

Polski

DANE PREPARATU KRWINEK P£YTKOWYCH Tabela 1 przedstawia poziom bakterii w preparatach p∆ytek w momencie inkubacji oraz po 24 godzinach przechowywania, kiedy próbki zosta∆y pobierane do Zestawu Próbek Pall eBDS w celu poddania 24- do 30-godzinnej inkubacji, oraz wyniki w zakresie czêstoœci wykrywania (Osocze obejmuje wyniki dla ubogoleukocytarnych i zawieraj◊cych nie redukowan◊ liczbê leukocytów preparatów p∆ytek).

Tabela 1

S. epidermidis

Zawartoœæ bakterii w momencie pobrania próbki po 24 godz. przechowywania (Czas pobrania próbki = 24 godz., 24-30 godzin inkubacji)

Wykrywalnoœæ w próbkach po 24 godzinach. Próbki z wynikiem dodatnim spoœród liczby testowanych próbek Osocze

Mediana poziomu inkubacji bakterii (zakres) CFU/ml osocza

Mediana poziomu inkubacji bakterii (zakres) CFU/ml PAS

7 (2-52)

4 (1-10)

7

15

19

7

16

2

3

2

45 z 45

5 (2-20)

10 (1-17)

3

6

11

2

17

8

14

10

45 z 45

8 (2-51)

8 (3-25)

2

8

39

24

47 z 47

32

24

41 z 41

17

9

38 z 38

≤5 CFU/ml Osocze

≤5 6-15 6-15 16-50 16-50 >51 >51 CFU/ml CFU/ml CFU/ml CFU/ml CFU/ml CFU/ml CFU/ml PAS PAS Osocze Osocze PAS PAS Osocze

ATCC#49134

S. agalactiae ATCC#12927

S. aureus ATCC#27217

P. aeruginosa

9 (1-15)

8 (3-17)

8 (1-55)

10 (2-34)

1

1

8

11

1

2

3

8

37

20

44 z 44

1

11

16

19

46 z 46

2

41

20

51 z 51

14

17

50 z 50

51

20

62 z 62

264

165

469 z 469 (100%)

ATCC#27853

S. choleraesuis

7

ATCC#8326

E. coli

6 (2-15)

6 (1-20)

5

2

8 (2-13)

13 (5-32)

14

5

ATCC#25922

E. cloacae ATCC#29005

B. cereus

13 (3-27)

3 (1-7)

5

3

5 (1-17)

5 (1-14)

21

11

9 (1-16)

9 (1-18)

7

1

ATCC#7064

K. pneumoniae

1

4

2

ATCC#8045

S. marcescens

3

ATCC#43862

RAZEM

73

22

17

55

77

19

Tabela 2 przedstawia poziom bakterii w preparatach p∆ytek po 24 godzinach przechowywania, kiedy próbki zosta∆y pobierane do Zestawu Próbek Pall eBDS w celu poddania 18-godzinnej inkubacji, oraz wyniki w zakresie czêstoœci wykrywania (wyniki dla ubogoleukocytarnych i zawieraj◊cych nie redukowan◊ liczbê leukocytów preparatów p∆ytek).

Tabela 2 Wykrywalnoœæ w próbkach Zawartoœæ bakterii w momencie pobrania próbki po 24 godzinach. po 24 godz. przechowywania (Czas pobrania próbki = Próbki z wynikiem 24 godz., 18 godzin inkubacji) dodatnimspoœród > 51 6 - 15 16 - 50 liczby testowanych ≤5 CFU/mL CFU/ml CFU/ml CFU/ml próbek Osocze Osocze Osocze Osocze Osocze S. epidermidis

15

12

10

7

44 z 48

16

4

12

6

38 z 38

3

2

6

28

39 z 39

3

35

38 z 39

ATCC#49134

S. agalactiae ATCC#12927

S. aureus ATCC#27217

P. aeruginosa ATCC#27853

S. choleraesuis

16

5

38 z 38

28

38 z 38

10

7

8

2

16

5

5

4

16

8

6

7

37 z 39

7

1

3

49

60 z 61

96

45

70

208

419 z 429 (97,7%)

ATCC#8326

E. coli ATCC#25922

E. cloacae

14

8

43 z 45

35

44 z 44

ATCC#29005

B. cereus ATCC#7064

K. pneumoniae ATCC#8045

S. marcescens ATCC#43862

RAZEM

3

Polski

DANE PREPARATÓW KRWINEK CZERWONYCH W tabeli 3. przedstawiono poziom bakterii i wykrywalnoœæ w preparatach p∆ytek krwi badanych tu¿ po zaka¿eniu (Czas Próby = 0 godz.).

Tabela 3 Poziom bakterii we krwi pe∆nej pobranej z ubogoleukocytarnego preparatu krwinek czerwonych natychmiast po inokulacji i wymieszaniu (Czas badania = 0 godz.)

Wykrywalnoœæ w próbkach po 0 godz. Liczba wykrytych przypadków, na ró¿nych poziomach CFU/ml Bakterie

< 5 CFU/ml

K. pneumoniae

6-15 CFU/ml

16-50 CFU/ml

> 51 CFU/ml

Ca∆kowita liczba wykrytych przypadków

4

11

3

18 z 18

6

1

10

5

ATCC#8045

S. liquefaciens

8

15 z 15

ATCC#35551

P. aeruginosa

3

18 z 18

ATCC#278530

P. putida

3

3

6z6

3

18 z 18

ATCC#492819128

P. fluorescens

8

5

2

ATCC#17569

E. amnigenes

5

3

2

10 z 10

11

4

15 z 15

7

3

3

22 na 22

3

7

3

13 z 13

ATCC#33731

E. coli ATCC#25922

Y. enterocolitica

9

ATCC#27729

B. cereus ATCC#7064

L. monocytogenes

10

10 z 10

1

10 z 10

ATCC#19115

S. aureus

1

8

2

8

33

68

ATCC#27217

S. epidermidis

3

13 z 13

21

168 ze 168 (100%)

ATCC#49134

RAZEM

46

W tabeli 4 przedstawiono poziom bakterii w PC w momencie zaka¿enia i po 24 godz. przechowywania w trakcie którego próbki znajdowa∆y siê w zestawie testowym Pall eBDS (Czas Próby = 24 godz.) oraz czêstotliwoœæ wykrywania.

Tabela 4 Poziom bakterii w krwi pe∆nej, pobranej z ubogoleukocytarnego preparatu krwinek czerwonych, po up∆ywie 24 godzin przechowywania (Czas badania = 24 godz.)

Wykrywalnoœæ w próbkach po 24 godz. Liczba wykrytych przypadków, na ró¿nych poziomach CFU/ml < 5 CFU/ml

6-15 CFU/ml

16-50 CFU/ml

> 51 CFU/ml

Ca∆kowita liczba wykrytych przypadków

K. pneumoniae

2

4

9

3

18 z 18

S. liquefaciens

9

5

1

P. aeruginosa

1

9

6

2

18 z 18

P. putida

1

2

P. fluorescens

2

7

2

E. amnigenes

6

1

2

9z9

8

7

15 z 15

1

2

5

17 z 17

4

3

5

12 z 12

1

6

10 z 10

9

1

10 z 10

Bakterie

E. coli Y. enterocolitica

9

B. cereus L. monocytogenes

3

S. aureus

15 z 15

3

6z6

3

14 z 14

S. epidermidis

4

5

1

3

13 z 13

RAZEM

37

56

40

24

157 of 157 (100%)

4

Polski

DANE PREPARATÓW KRWINEK CZERWONYCH ci◊g dalszy W tabeli 5. przedstawiono poziom bakterii w PC w momencie zaka¿enia i po 7. dniach przechowywania w trakcie którego próbki znajdowa∆y siê w zestawie testowym Pall eBDS (Czas Próby = 7 dni) oraz czêstotliwoœæ wykrywania.

Tabela 5

Poziom bakterii w pe∆nej krwi pobranej z ubogoleukocytarnego preparatu krwinek czerwonych w próbce pobranej z preparatu przechowywanego przez 7 dni (Czas badania = 7 dni)

Wykrywalnoœæ w próbkach pobranych po up∆ywie 7 dni Liczba wykrytych przypadków, na ró¿nych poziomach CFU/ml Bakterie K. pneumoniae

< 5 CFU/ml

6-15 CFU/ml

16-50 CFU/ml

12

12 z 12

S. liquefaciens P. aeruginosa P. putida

> 51 CFU/ml

Ca∆kowita liczba wykrytych przypadków

6

8

2

P. fluorescens

15

15 z 15

3

17 z 17

3

5z5

18

18 z 18

E. amnigenes

1

1

E. coli

11

4

Y. enterocolitica

3

1

1

B. cereus

4

4

3

L. monocytogenes

1

4

S. aureus

5

4

1

S. epidermidis

4

3

2

4

13 z 13

RAZEM

43

27

16

67

153 of 153 (100%)

1

7

10 z 10 15 z 15

12

17 z 17 11 z 11

5

10 z 10 10 z 10

W tabeli 6. przedstawiono poziomy bakterii w ubogoleukocytarnym preparacie krwinek czerwonych oraz wykrywalnoœæ w zestawie testów Pall eBDS, po up∆ywie 21 dni przechowywania (Czas badania = 21 dni), oraz wyniki czêstoœci wykrywania.

Tabela 6 Poziom bakterii w krwi pe∆nej, pobranej z ubogoleukocytarnego preparatu krwinek czerwonych, przechowywanego przez 21 dni (Czas badania = 21 dni)

Wykrywalnoœæ w próbkach pobranych po up∆ywie 21 dni Liczba wykrytych przypadków, na ró¿nych poziomach CFU/ml Bakterie

< 5 CFU/ml

6-15 CFU/ml

1

1

P. aeruginosa

4

7

P. putida

3

K. pneumoniae

16-50 CFU/ml

6 2

P. fluorescens E. amnigenes 9

Y. enterocolitica

2

B. cereus

4

Ca∆kowita liczba wykrytych przypadków 2z2

S. liquefaciens

E. coli

> 51 CFU/ml

15

15 z 15

1

18 z 18

1

6z6

18

18 z 18

10

10 z 10 9z9

15

17 z 17 4z4

L. monocytogenes

3

1

S. aureus

6

4

S. epidermidis

7

RAZEM

39

6

10 z 10 10 z 10

13

5

2

1

10 z 10

10

67

129 of 129 (100%)

Polski

DANE PREPARATÓW KRWINEK CZERWONYCH ci◊g dalszy W tabeli 7. przedstawiono poziomy bakterii w ubogoleukocytarnych preparatach krwinek czerwonych oraz wykrywalnoœæ po up∆ywie 35 (CPD/SAG-M) lub 42 dni przechowywania (CP2D/AS-3), po czasie, po którym pobrano próbki do badañ zestawem testów Pall eBDS (Czas badania = 35 lub 42 dni), oraz wyniki czêstoœci wykrywania.

Tabela 7 Poziom bakterii we krwi pe∆nej pobranej z ubogoleukocytarnego preparatu krwinek czerwonych, po up∆ywie 35 (CPD/SAG-M) lub 42 dni przechowywania (CP2D/AS-3) (Czas badania = 35 lub 42 dni)

Wykrywalnoœæ w próbkach pobranych po up∆ywie 35 lub 42 dni > 51 CFU/ml

Ca∆kowita liczba wykrytych przypadków

10

10 z 10

3

2

18 z 18

2

1

5z5

Liczba wykrytych przypadków, na ró¿nych poziomach CFU/ml Bakterie

< 5 CFU/ml

6-15 CFU/ml

16-50 CFU/ml

K. pneumoniae

0z0

S. liquefaciens P. aeruginosa

10

P. putida

2

3

P. fluorescens

13

13 z 13

E. amnigenes

10

10 z 10

12

12 z 12

7

10 z 10

E. coli

4

4z4

Y. enterocolitica B. cereus

2

L. monocytogenes

1

S. aureus

9

S. epidermidis

8

RAZEM

36

2z2 2

9z9 3 3

10

6

11 z 11 55

104 of 104 (100%)

Aktualna wersja instrukcji u¿ytkowania (IFU) tego produktu: Numer partii ulotki: 147400034Z Data ostatniej aktualizacji: luty 2007 Mog◊ Pañstwo otrzymaæ instrukcjê u¿ytkowania w wybranej wersji jêzykowej, wybieraj◊c jedn◊ z nastêpuj◊cych mo¿liwoœci: Pobranie pliku instrukcji ze strony: www.pall.com/eBDS_EU Kontakt e-mailowy: wysy∆aj◊c e-mail na adres [email protected], otrzymaj◊ Pañstwo instrukcjê w formacie PDF. Telefonicznie: dzwoni◊c pod numer 00 800 3876 7255 mog◊ Pañstwo zamówiæ instrukcjê zarówno w wersji papierowej jak i na p∆ycie CD. Instrukcje u¿ytkowania mo¿na równie¿ otrzymaæ od lokalnego przedstawiciela firmy Pall.

MANUFACTURER Pall Medical, a division of Pall Europe Ltd., Europa House, Havant Street, Portsmouth, PO1 3PD, England +44 (0)23 9230 3452 phone +44 (0)23 9230 3324 fax INTERNATIONAL OFFICES Pall France S.A., 3 Rue des Gaudines, BP 5253, 78175 St-Germain-en-Laye, Cedex, France Pall GmbH, Philipp-Reis-Straße 6, D-63303 Dreieich, Deutschland Pall Schweiz AG, Schäferweg 16, CH-4057 Basel, Schweiz

Pall Austria Filter Ges. m. b. H., Thaliastraße 85, A-1160 Wien, Österreich Pall Italia s.r.l., Via Emilia, 26, 20090 Buccinasco (MI), Italia Pall España s.a., c/ Isla de Córcega, 2, 28100 Alcobendas, Madrid, España CORPORATE HEADQUARTERS Pall Corporation, 2200 Northern Boulevard, East Hills, NY 11548, USA Prosimy o odwiedzenie naszej strony internetowej www.pall.com 147400034Z, wydano w lutym 2007 roku.