HLA-DR en Monocitos y Macrófagos

Nombre: Nicolás Opazo Ríos Docentes : Marcelo Castillo. Juan Luis Castillo.

Tecnología Médica. Universidad de Concepción.

Genes Genes del del MHC MHC Humano Humano class II DP

2

class I

DQ


2

1

DP


1

B C

DR

2










B

C

A


2

1

3

DQ


1

1

2

3

DR

A

9




Enfermedad Injerto vs. Huesped

Procesamiento antigénico de moléculas MHC-II

1 . Los antígenos exógenos son endocitados y procesados por el sistema endosomal- lisosomal. 2 .En el reticulo endoplásmico, las moléculas MHC-II se asocian con la cadena invariante li. 3 -Esta molécula impide la unión de pépticos a la MHC-II y la guía, a través del complejo Golgi, hasta un compartimiento de naturaleza ácida denominado MHC de clase II ( MHC), en donde ocurre la degradación parcial de la cadena li. 4. En la hendidura del MHC, permanece un fragmento de molécula li, denominado CLIP, hasta que con la colaboración de la proteína HLA-DM, sea intercambiado por el péptido derivados del antígeno exógeno.. - Así se genera una molécula de MHC clase II estable que será expresada en la superficie de la APC.

• Procesamiento antigénico de moléculas MHC-II Ltheper CD4

endocitosis

1

MHC-II

degradación HLA-DM 4

antígenos

MHC-II

3 MHC-II

CLIP MHC

2

li MHC-II

Proteina li

Golgi

Reticulo endoplásmico

% de HLA-DR en monocitos Rango (%)

Interpretación neonatos (**)

56 – 100 Normal 41 – 56

Inmunodepresión. Cuadro infeccioso moderado a severo. Presencia de síndrome distrés respiratorio.

25 – 55

Inmunodepresión severa. Presencia de inflamación sistémica, sepsis.

Menor a 24

Inmunodepresión severa, sepsis, compromiso vital severo de alto riesgo.

ESTUDIO DE EXPRESION DE HLA-DR EN MONOCITOS METODOLOGIA : CITOMETRIA DE FLUJO EQUIPO : CITOMETRO DE FLUJO FACSCalibur ( BD) Juan Luis Castillo, Laboratorio De Citometria de Flujo, Hospital del Trabajador.

Sepsis, shock séptico y síndrome de disfunción multiorgánica. Sepsis: se define como la respuesta inflamatoria sistémica frente a la infección. Shock séptico: cuadro de sepsis severa con hipotensión arterial que no responde a reanimación adecuada con líquidos, recurriendo al uso de drogas vasopresoras.

Síndrome de disfunción multiorgánica: disfunción que imposibilita mantener la homeostasis sin intervención terapéutica. A nivel ,fisiológico se define como la insuficiencia orgánica múltiple.

Fisiopatología de la sepsis

Probablemente la causa de una sepsis pueda ser una bacteriemia. El LPS entra en contacto con el monocito a nivel sanguíneo o con el macrófago a nivel tisular produciendo la activación celular. Esta interacción es mediada por el receptor especifico de membrana (CD14) presente en células inmunocompetentes, Este se activa y induce la activación de mediadores intracelulares como las proteinkinasas que inician los procesos de transcripción génica para el TNF alfa, el cual es sintetizado y posteriormente secretado a nivel citoplasmático en una forma madura.

Adhesión de leucocitos al endotelio Monocito TNF IL-1 Neutrófilo Adhesion IL-6, IL-8

Tumour necrosis factor (TNF) Citokinas: IL-6, IL-8, IL-10 Radicales libres de oxígeno Platelet activating factor Proteasas Inflamación Prostaglandinas Coagulación Leukotrienes ↓ fibrinolisis Bradikinina Trombosis microvascular Tissue factor Daño endotelial

Endotelio Macrofagos

IL: interleukina

Sitio de inflamación Mediadores chemotácticos (e.j. selectinas) atraen leucocitos al sitio de inflamación

ENDOTELIO CAMBIOS EN INFLAMACION → procoagulante  Expresión de moléculas de adhesión  Producción de mediadores inflamatorios  Producción de compuestos vasoactivos  Anticoagulante

3.6a

El TNF alfa y la IL-1 determinan la fisiopatología del estado séptico a través de sus efectos sobre la Tº ( inducción de fiebre, posiblemente hipotermina), la resistencia y la permeabilidad vascular, la función cardiaca la médula ósea ( producción de leucocitos.) Todo lo mencionado sustenta la idea que los mediadores esenciales de la sepsis mostrando variados efectos serian las citoquinas y no la endotoxina. Muchos de los efectos de las citoquinas son mediados a nivel tisular por el óxido nítrico, prostaglandinas, eicosanoides, PAF por mencionar algunos. Estimulo Ej. Acetilcolina o shear stress)

ecNOS

Vasodilatacion/ regulacion del flujo sanguíneo

Oxido nitrico NO: Efecto vascular en función normal

NO: efecto vascular en sepsis Estímulo Ej:. Acetilcolina o shear stress)

ecNOS iNOS Sobre-expresión de iNOS

Vaso dilatación/ regulación del flujo sanguíneo

Oxido nítrico

Sepsis

Excesiva vaso dilatación hipotensión refractaria

Estímulo (ej. LPS, IL-1, TNF, PAF)

SHOCK SEPTICO

ecNOS: endothelial constitutive nitric oxide synthase, iNOS: inducible nitric oxide synthase LPS: lipopolysaccharide, IL: interleukina, PAF: platelet activating factor, TNF: tumour necrosis factor

• Juntamente

con la presencia de todos estos eventos hay producción de sustancias antiinflamatorias. •Además algunas citoquinas liberadas como la IL-4, IL-6 e IL-10. •Así se disminuyen la síntesis de TNF alfa e IL-1 en PMN como respuesta a la endotoxina. • Es necesario acotar que esta última ( IL-10) mediaría el secuestro intracelular del HLA-DR en monocitos durante el shock séptico.

Falla del sistema inmune en la sepsis • Los

pacientes sépticos muestran cuadros consistentes de inmunosupresión. • Primero comienza una fase inflamatoria que al momento

se revierte con la producción de péptidos antiinflamatorios el cual produce una cambio dirigido a una estado inmunosupresivo.

• Con la administración de INF gamma, mejora la

sobrevivencia de estos pacientes.

Mecanismos de inmunosupresión en la sepsis Las citoquinas dirigen la diferenciación de las células T en Th1 o Th2 Célula T-CD4+ virgen Activación por Ag

rIL-2

IL-12/IFNγγ Macrófagos Dendríticas NK

Célula Th1

IL-2 IL-4

Mastocitos Eosinófilos CD4+NK1.1 Células T

Célula Th2

• Los monocitos de los pacientes con quemaduras y con traumatismos tienen niveles reducidos de citoquinas TH1 y un aumento en los niveles TH2, la cual mejora la sobrevivencia de pacientes con sepsis.

• Otros estudios indican que la IL-10 regulan este proceso que podría ser indicativo de muerte.

• La anergia es un estado en donde no hay respuesta frente al antígeno, las células T son anérgicas cuando fallan su proliferación y producción de citoquinas en respuesta a antígenos específicos. • Estudios en peritonitis demuestran aumento del patrón TH2 sobre el TH1, lo que concuerda con el estado de anergia.

• Estudios recientes demuestran que tanto linfocitos como células epiteliales gastrointestinales mueren por apoptosis durante sepsis. • Un mecanismo potencial responsable de esta apoptosis puede ser el stress- injuria inducido por la liberación de glucocorticoides. •La apoptosis celular induce anergia o citoquinas antiinflamatorias que empeoran la respuesta frente a patógenos, mientras que la necrosis celular produce estimulación inmune y aumenta las defensas microbianas.

B) Antígenos presentados en células APC no profesionales.

MHC II péptido

TcR

Célula T CD4+ B7

CD28

APC NO PROFESIONAL • La perdida de los linfocitos B, TCD4 y células dendríticas disminuye la producción de anticuerpos, activación de macrófagos y la presentación de antígenos respectivamente.

ANERGIA

inmunoparálisis

Depresión Disfunción monocitaria mediada por opioides en pacientes con depresión mayor. A.castilla, M.L Subira, M.L Civeira Centro d einvestigaciones Biomedicas. Depto,. De medicina interna r inmunologia. Clinica Universitaria. Universidad d e Navarra. Pamplona. 1992

Fundamento: los pacientes con depresión presentan una inmunodepresión y se ha propuesto que en ellos, péptidos opiáceos endógenos pueden ser los mediadores entre la disfunción del sistema nervioso central y las alteraciones de la inmunidad.

Se estudió la función y los marcadores de superficie de monocitos en 15 pacientes con depresión mayor unipolar. Resultados: la mayoría de los pacientes (86 %), presentó una disfunción en la expresión de filamentos intermedios de vimentina del citoesqueleto y de las moléculas de membrana, CRI y antígenos HLA-DR.

Conclusión: los pacientes con depresión mayor unipolar presentan un alto tono opioide que tiene consecuencias en la función del sistema inmune.

Published ahead of print on March 17, 2004, doi:10.1164/rccm.200309-1329OC This Article American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine Vol 169. pp. 1144-1151, (2004) © 2004 American Thoracic Society

Monocyte Human Leukocyte Antigen–DR Transcriptional Downregulation by Cortisol during Septic Shock HLA-DR cortisol monocito

antiinflamatorio

Downregulation

HLA-DR HLA-DR HLA-DR CTAII

núcleo

monocito

Rol de la interleukina 10en el secuestro intracelular del HLA-DR en monocitos durante Shock séptico.2002 American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine Vol 169. pp. 11441151, (2004) © 2004 American Thoracic Society Monocyte Human Leukocyte Antigen–DR Transcriptional Downregulation by Cortisol during Septic Shock The American Journal of Gastroenterology Online Early doi:10.1111/j.1572-0241.2006.00495.xVolume 0 Issue 0 A Strong Association Between Down-Regulation of HLA-DR Expression and the Late Mortality in Patients with Severe Acute Pancreatitis.