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˜ OFICINA ESPANOLA DE PATENTES Y MARCAS

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k ES 2 036 650 kInt. Cl. : A61K 35/78

11 N.◦ de publicaci´ on: 5

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˜ ESPANA

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TRADUCCION DE PATENTE EUROPEA

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kN´umero de solicitud europea: 88116343.0 kFecha de presentaci´on : 03.10.88 kN´umero de publicaci´on de la solicitud: 0 311 866 kFecha de publicaci´on de la solicitud: 19.04.89

T3

86 86 87 87

k

54 T´ıtulo: Producto diet´ etico para el tratamiento de las lipoproteinas relacionadas al metabolismo del

colesterol.

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73 Titular/es: Soci´ et´ e des Produits Nestle S.A.

k

72 Inventor/es: Berger, Manfred;

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74 Agente: Isern Cuyas, Jaime

30 Prioridad: 16.10.87 CH 4069/87

Service des Brevets Case postale 353 CH-1800 Vevey, CH

45 Fecha de la publicaci´ on de la menci´on BOPI:

01.06.93

45 Fecha de la publicaci´ on del folleto de patente:

01.06.93

Aviso:

k k

Spielmann, Dani´ ele y Traitler, Helmut

k

En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicaci´on en el Bolet´ın europeo de patentes, de la menci´on de concesi´on de la patente europea, cualquier persona podr´a oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposici´on deber´a formularse por escrito y estar motivada; s´olo se considerar´a como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposici´ on (art◦ 99.1 del Convenio sobre concesi´on de Patentes Europeas). Venta de fasc´ ıculos: Oficina Espa˜ nola de Patentes y Marcas. C/Panam´ a, 1 – 28036 Madrid

2 036 650 DESCRIPCION El invento hace referencia a la utilizaci´ on de un l´ıpido del casis en el tratamiento de las anomalias de las lipoproteinas relacionadas al metabolismo del colesterol. 5

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Los l´ıpidos circulan en la sangre bajo la forma de lipoproteinas solubles en medios acusosos constituidos de un n´ ucleo lip´ıdico de colesterol esterificado por a´cidos grasos y triglic´eridos rodeados por una capa de prote´ınas, fosofl´ıpidos y colesterol libre. La disposici´ on de estos diferentes componentes es lo que caracteriza el tipo de lipoproteina. Numerosos estudios epidemiol´ ogicos ponen de manifiesto el papel preponderante que juegan las lipoproteinas en el desarrollo de la aterosclerosis. Simplificando, se admite que ciertas lipoproteinas, denominadas de baja densidad (LDL) constituyen una fracci´ on de riesgo cardiovascular dado que existe una correlaci´ on positiva entre su presencia en un porcentaje elevado en la circulaci´on sangu´ınea y la aterosclerosis. Por contra, las lipoproteinas de alta densidad (HDL) constituyen un factor antirriesgo cardiovascular puesto que se observa una correlaci´on negativa entre su porcentaje y la enfermedad. Por consiguiente, existe un “colesterol bueno”, transportado por las HDL que drenan el colesterol de la pared arterial para retornarlo una vez que ha sido catabolizado. Por contra, las LDL depositan el colesterol sobre la pared arterial. Se sabe que los aceites ricos en ´acidos grasos poliinsaturados tienen por efecto bajar el porcentaje total de colesterol (CT) plasm´ atico. No obstante, en los estudios realizados, la baja del CT se debe bien sea a una baja concomitancia del colesterol de las LDL (CLDL) y del colesterol de las HDL (CHDL), bien a una baja del CLDL en la modificaci´ on del CHDL. Seg´ un D.V. Horrobin y Coll, en Lipids, volumen ags. 558-561, este u ´ ltimo caso ser´ıa el del aceite de onagra. 18, n◦ 8, p´ Tambi´en se sabe a trav´es de la patente JP-A-61 118318 que una mezcla l´ıpidica sin´ergica de un alcohol triterp´enico c´ıclico espec´ıfico sint´etico y de un aceite altamente insaturado podr´ıa reducir los porcentajes de colesterol libre y de colesterol de las LDL y aumentar el porcentaje de colesterol de las HDL en el plasma sangu´ıneo. Sorprendentemente hemos descubierto que la sola administraci´ on de aceite de pepitas de casis hace bajar el CLDL a la vez que aumenta de modo significativo el CHDL. Por tanto, el invento hace referencia a la utilizaci´on de un l´ıpido del casis para fabricar una composici´on para el tratamiento de las anomalias de las lipoproteinas relacionadas al metabolismo del colesterol. Bajo el t´ermino “anomalias de las lipoproteinas relacionadas al metabolismo del colesterol”, se entiende:

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45

– la hipercoresterolem´ıa esencial (tipo IIa) caracterizada por un porcentaje normal de triglic´eridos (TG), un aumento del CT correspondiente a un aumento del CLDL y a una disminuci´ on del porcentaje normal del CHDL, – la hiperlipidemia mixta (tipo IIB), caracterizada por un aumento del porcentaje normal del TG, un aumento del porcentaje normal del CT, correspondiente a un aumento del CLDL y a una disminuci´on del CHDL. – la dis-beta-lipopriteinem´ıa (tipo III) caracterizada por un aumento del TG y del CT, siendo este u ´ ltimo claramente menos frecuente que los otros dos.

50

– la anomalia correspondiente a una bajo porcentaje de HDL. De acuerdo con el invento, se entiende por l´ıpido del casis:

55

– el aceite de pepitas de casis (Ribes nigrum), obtenido por la extracci´ on a partir de residuos de casis y refinado, por ejemplo tal como se indica en la patente europea no 92.085 o en la solicitud de patente europea n◦ 137.862. – una mezcla de ´acidos grasos procedentes de la hidr´olisis o del fraccionamiento del aceite de pepitas de casis, por ejemplo obtenidos de acuerdo a la solicitud de patente europea n◦ 178.442 o a la solicitud de patente europea n◦ 271,747,

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– una sal farmac´euticamente admisible de los ´acidos grasos precedentes, – un aceite obtenido por medio de reesterificaci´ on de una tal mezcla de a´cidos grasos con el glicerol, 2

2 036 650 – una mezcla de los l´ıpidos precedentes.

5

Preferentemente, el l´ıpido del casis puede protegerse contra la oxidaci´on por medio de un antioxidante liposoluble como por ejemplo el palmitato de ascorbilo, los tocoferoles o una mezcla de dichos antioxidantes. Las composiciones diet´eticas pueden presentarse en forma de emulsiones, como por ejemplo, de salsas, mayonesas o margarinas.

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Las composiciones farmac´euticas pueden presentarse bajo diferentes formas adaptadas a las modalidades de administraci´on, por ejemplo, por v´ıa oral, enteral, rectal o paraenteral. Por ejemplo, pueden prepararse c´ apsulas, g´elulas, supositorios o jarabes. En el caso de administraci´ on enteral o paraenteral, las composiciones se presentan en forma de soluciones o emulsiones f´ısica y qu´ımicamente estabilizadas, apir´ ogenas y est´eriles. La dosis administrada depende del tipo y de la gravedad de la anomal´ıa a tratar. Puede estar comprendida entre 1 y 25 g de l´ıpido de casis y, preferentemente de 2 a 5 g de aceite de casis por d´ıa, en toma u ´ nica o, preferiblemente, en 2 ´o 3 tomas separadas. El siguiente ejemplo ilustra el invento. En el mismo, las partes y porcentajes son en peso, salvo que se indique lo contrario. Ejemplo

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Condiciones experimentales

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Se han tratado pacientes con un porcentaje inicial de CT superior a 300 mg/dl, durante 12 semanas, con una dosis diaria media de 6 c´ apsulas de gelatina conteniendo bien 450 mg de aceite de pepitas de casis (HPC) y 200 ppm (parte por mill´ on) de palmitato de ascorbilo, o bien con 450 mg de aceite de pepitas de uva (HPR) y 200 ppm de pamitato de ascorbilo. La HPC est´a constituida por triglic´eridos de los siguientes a´cidos grasos, en peso

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acido linol´eico, C18:2,n−6 ´ ´cido gama-linol´enico, C18:3,n−6 a del cual el 38% es en la posici´on beta acido alfa-linol´enico, C18:3,n−3 ´ del cual el 17% es en la posici´on beta acido estearid´ ´ onico C18:4,n−3 del cual el 32% es en la posici´on beta

45 % 17 % 13 % 3,5 %

El a´cido gama-linol´eico representa el producto de la acci´on de la delta-6-desaturasa sobre el a´cido linol´eico. 45

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El a´cido estearid´ onico constituye el producto de la acci´ on de la delta-6-desaturasa sobre el a´cido alfalinol´enico. Las HPR contienen, en peso, alrededor del 70% de a´cido linol´eico, del 1 al 2% de ´acido alfa-linol´enico, pero ni contienen a´cido gama-linol´ enico ni a´cido estearid´ onico. Todos los pacientes recibieron una hoja informativa con las recomendaciones diet´eticas.

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El grupo que recibi´ o la HPC estaba formado por 5 pacientes comprendiendo 3 mujeres y 2 hombres con una edad media de 61 a˜ nos (de 36 a 76). El grupo que recibi´ o la HPR estaba constituido por 7 pacientes, 4 mujeres y 3 hombres con una edad media de 55 a˜nos (de 48 a 62). En ambos grupos los CT iniciales fueron similares. En ambos grupos la mayor parte de enfermos eran del tipo IIb, antes definido. Para el an´ alisis de par´ ametros se tomaron muestras de sangre a intervalos de 0, 4, 8 y 12 semanas.

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3

2 036 650 Resultados La tabla 1 adjunta indica los valores de los par´ ametros medios indicados (X) y las desviaciones tipo (ET) 5

Tabla 1 Grupos

CT

CHDL

CLDL

10

n

15

0

4

8

12

0

4

8

12

0

4

8

12

X 5 309,20 293,40 279,20 261,00 42,80 50,20 56,40 61,40 270,20 260,00 234,20 206,60 HPC ET 5 4,49 3,94 6,27 9,57 1,91 2,04 1,92 1,43 13,73 12,30 14,21 17,82 X 7 304,43 295,00 298,43 293,71 40,86 39,71 42,71 39,57 276,57 273,00 267,14 271,28 HPR

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ET 7 4,63 7,12 6,27 9,57 1,91 2,04 1,92 1,43 13,73 12,29 14,21 17,82 Probabilidad 0,492 0,865 0,079 0.003 0,526 0.130 0,029 0,001 0,790 0,593 0,191 0,021

para cada visita, as´ı como la probabilidad del control estad´ıstico (test T) para ambos grupos. El control T responde a la pregunta: ¿existe una diferencia entre las medias de los grupos estudiados y esto para cada visita?. Se han subrayado los casos m´ as significativos (probabilidad ≤ 0,05)., El CT (mg/dl) se dosific´ o encim´aticamente a partir del suero por medio de colorimetr´ıa utilizando las encimas colesterolesterasa, colesteroloxidasa y el revelador 4-aminofenacina.

30

El CHDL (mg/dl) se dosific´ o del mismo modo que el CT sobre la fracci´on que contenia las HDL obtenida despu´es de la ultracentrifugaci´ on del suero a 12000 rpm. El CLDL (mg/dl) se dedujo en funci´ on del valor CHDL seg´ un Friedewald y Fredickson. 35

40

La tabla 2 adjunta hace referencia a las probabilidades de los controles T llevados a cabo entre las visitas V4 , V8 , V12 y V0. En estos controles estad´ısticos se busca, a nivel separado de cada grupo, las diferencias existentes entre la visita V0 y las visitas sucesivas V4 , V8 y V12 , dicho de otro modo, la evoluci´on del fen´ omeno en funci´ on del tiempo. Tambi´en aqu´ı los casos m´as significativos han sido subrayados (probabilidad ≤ 0,05).

45

En la tabla 3 adjunta se estudia la relaci´ on existente entre CLDL/CHDL, la cual recibe el nombre de “riesgo estandar de aterogenicidad”, as´ı como las probabilidades del control T. La tabla 4 que sigue a continuaci´ on indica las probabilidades de los pares de controles T. Han sido subrayados los casos m´as significativos. (Ver Tabla 2 en pag. siguiente)

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55

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4

2 036 650 Tabla 2

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Grupo HPC Par´ ametros

10

Entre visitas

V4 -V0

V8 -V0

V12 -V0

V4 -V0

V8 -V0

V12 -V0

V4 -V0

V8 -V0

V12 -V0

Probabilidad| n=5

0,003

0,040

0,010

0,233

0,025

0,010

0,066

0,016

0,002

Grupo HPR Probabilidad| n=7

0,045

0,219

0,143

0,030

0,408

0,233

0,303

0,028

0,393

15

CT

CHDL

CLDL

20

Tabla 3 Grupos

CLDL/CHDL

25

n

0

4

8

12

X

5

6,34

5,63

4,24

3,48

ET X

5 7

0,44 6,86

0,95 6,97

0,34 6,35

0,38 6,93

ET Probabilidad

7

0,45 0,445

0,42 0,184

0,49 0,010

0,56 0,010

30

HPC

HPR

35

40

Tabla 4 GRUPO HPC Entre visitas

45

Probabilidad GRUPO HPR Probabilidad

50

V4 -V0

V8 -V0

V12 -V0

n=5

0,259

0,001

0,001

n=7

0,298

0,158

0,740

Conclusiones 55

60

En el grupo HPC, la media de CHDL ha aumentado claramente (+43,5%), las medias del CLDL y del CT han disminuido (-23,5% y -15,6%, respectivamente), mientras que la media del factor riesgo estandar de la aterogenicidad ha disminuido de 6,34 a 3,48 durante el tratamiento. Comparativamente, los valores correspondientes del grupo HPR han sido: CHDL (-3,2%), CLDL (-1,9%), CT (-3,5%)

5

2 036 650 La media del factor de riesgo estandar de aterogenicidad practicamente no ha variado (de 6,86 a 6,93).

5

Por tanto, se ve que la administraci´ on de HPC conduce a un descenso del CT debido unicamente a una baja del CLDL sin la participaci´ on del CHDL que, por contra, aumenta de un modo sustancial. El riesgo estandar de aterogenicidad, por lo tanto, disminuye mucho. Por contra, la administraci´on de HPR no comporta ninguna mejora en el estado patal´ ogico de los pacientes.

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2 036 650 REIVINDICACIONES

5

1. Utilizaci´on de un l´ıquido del casis para fabricar una composici´ on diet´etica destinada al tratamiento de las anomalias de las lipoproteinas relacionadas el metabolismo del colesterol. (Reserva del art. 167.2 CPE). 2. Utilizaci´on de acuerdo a la reivindicaci´ on 1, bajo una forma adaptada a la administraci´ on por v´ıa oral, enteral o paraenteral. (Reserva del art. 167.2 CPE).

10

3. Utilizaci´on de acuerdo a la reivindicaci´ on 1, bajo una forma que proporcione una dosis cotidiana de 1 a 25 g de l´ıpido del casis. (Reserva del art. 167.2 CPE). 4. Utilizaci´on de acuerdo a la reivindicaci´ on 3, bajo una forma que proporcione una dosis cotidiana de 2 a 5 g de aceite de casis. (Reserva del art. 167.2 CPE).

15

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Las reivindicaciones con la menci´ on del art. 167.2 del Convenio Europeo de Patentes no producir´ an efectos en Espa˜ na en la medida en que confieran protecci´ on a productos qu´ımicos o farmac´euticos, conforme a la disposici´ on transitoria del RD 2424/1986, de 10 de Octubre relativo a la aplicaci´ on del Convenio de Patente Europea (CPE).

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