LOGOTIPO DEL LABORATORIO

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RECUENTO DE LEUCOCITOS EN SANGRE TOTAL OBJETO Establecer el procedimiento para realizar el recuento de leucocitos o glóbulos blancos en el laboratorio CALIDAD. CAMPO DE APLICACIÓN Este procedimiento es aplicado a las muestras de pacientes que soliciten esta prueba. RESPONSABLES El responsable de llevar a cabo este procedimiento será el profesional designado para esta tarea en el área de Hematología del laboratorio CALIDAD. La responsabilidad del responsable de calidad será verificar el cumplimiento del procedimiento y verificar el control de calidad. La responsabilidad del jefe de laboratorio será asegurar el suministro de materiales y reactivos para que este procedimiento se cumpla. DEFINICION RECUENTO DE LEUCOCITOS, determinación del número de células sanguíneas (leucocitos o glóbulos blancos) por unidad de volumen sanguíneo. BIOSEGURIDAD Qué medidas de bioseguridad se tomarán en cuenta para realizar el procedimiento. DESARROLLO DEL PROCEDIMIENTO EQUIPOS, MATERIALES, REACTIVOS a) EQUIPOS - Que equipos se utilizaran. Ojo, las micropipetas son consideradas equipos y no materiales de trabajo. b) MATERIALES - Tips. - Cámara de Neubauer.

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- Cubre cámara. - Tubo de hemolisis de vidrio, etc. c) REACTIVOS - Qué reactivos serán utilizados para el procedimiento Ejemplo: Reactivo de Turck.

FUNDAMENTO Escribir el fundamento del método utilizado. En este ejemplo el fundamento del recuento de leucocitos. PROCEDIMIENTO a) PROCEDIMIENTO MANUAL -

Verificar la calidad de la muestra. Registro de la muestra. Asignar el código o número correspondiente. Mezclar bien la muestra, idealmente con el agitador mecánico o manualmente por inversión. Depositar 0,38 ml de la solución de Turk en un tubo de hemólisis. Absorber 20 microlitros de la muestra, limpiar bien el exterior de la puntilla (Tip). Depositar la muestra en el líquido de Turk, absorbiendo hasta que la puntilla quede limpia y mezclar. Adherir el cubre cámara a la cámara de Neubauer. Depositar la mezcla: muestra-reactivo de Turk en los retículos de la cámara. Dejar reposar la cámara de 1 a 2 minutos. Leer con objetivo de 10X. Contar los leucocitos en los cuatro cuadrantes externos (para leucocitos) de los retículos de la cámara. Para el resultado, al número total de leucocitos obtenido del recuento de los cuatro cuadrantes, se multiplica por el factor. (cada laboratorio establece su factor dependiendo de la dilución que se realiza).

b) PROCEDIMIENTO AUTOMATIZADO -

Verificar la calidad de la muestra. Mezclar bien la muestra. Destapar el tubo con la muestra. Introducir a la aguja de aspirado del equipo Beckman Coulter.

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Presionar el botón de aspirado. Retirar la muestra. Registrar los resultados obtenidos.

AMBIENTE Este procedimiento será realizado en el área de Hematología. MUESTRA Sangre total con anticoagulante EDTA. RECOLECCION DE LA MUESTRA Ver POE Obtención de sangre venosa o capilar. CONSERVACION Las muestras deben procesarse lo más antes posible, en su defecto se pueden guardar hasta 24 horas a temperatura ambiente. INTERFERENCIAS -

El mal limpiado de la cámara puede incurrir a errores. Muestra con coágulos. Muestras hemolizadas. Inadecuada proporción muestra/anticoagulante. Pipeta mal calibrada. Cargado con burbujas. Mala dilución de la muestra con el reactivo. Dejar secar el reactivo de la cámara, produciéndose una concentración de células.

VALIDACION - Correlacionar los resultados con los datos del paciente. - Correlacionar con la cantidad de células observadas y cuantificadas en el frotis sanguíneo. - Correr a la par una muestra control. - No debe existir gran diferencia de células contadas entre retículo y retículo. (El laboratorio debe establecer la diferencia de células aceptadas entre cuadrante y cuadrante este no debe ser mayor a 10 células).

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INTERVALO BIOLOGICO DE REFERENCIA 4 0 – 8,0 x 109 L (Cada laboratorio establece sus valor de referencia.) CONTROL DE CALIDAD - Verificar que la muestra no presente coágulos, micro coágulos o hemolisis. - Verificar que los parámetros iniciales del equipo se encuentren dentro el rango establecido. - Correr muestras controles de nivel normal, alto y bajo. - Usar micropipetas que estén bien calibradas. - Verificar que el reactivo de Turck no presente contaminación. Etc. FORMULARIOS -

Formulario para registro de pacientes. Formulario de resultados de Hematología. Formulario de entrega de resultados. Etc.

REGISTROS -

Registro de pacientes. Registro de resultados. Registro de control de calidad interno, etc.

ANEXOS Colocar los formularios que se utilizaran en este procedimiento.

ESTE ES UN MODELO PARA ELABORAR UN PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR (POE), POR FAVOR USENLO COMO UNA SIMPLEMENTE, USTEDES PUEDEN MODIFICAR Y REDACTAR DE ACUERDO A SUS CRITERIOS Y PROCEDIMENTOS UTILIZADOS EN EL LABORATORIO. LOS POE’s NO DEBEN SER COMPLICADOS, DEBEN SER SENCILLOS Y FACILES DE USAR POR TODO EL PERSONAL DEL LABORATORIO AUTORIZADO PARA REALIZAR LOS DIFERENETES PROCEDIMIENTOS. DEBEN ESCRIBIR UN POE PARA DETERMINACION QUE SE REALICE EN SU LABORATORIO.

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ESPERO LES SEA DE MUCHA UTILIDAD ESTA AYUDA, EXISTE BIBLIOGRAFIA PARA ESCRIBIR LOS POE’S Y LOS DIFERENTES DOCUMENTOS QUE FORMAN PARTE DEL SISTEMA DE GESTION DE CALIDAD, EN INTERNET PODRAN ENCONTRAR MAS MODELOS DE POE’S Y MOELOS DE LOS DIFERENTES DOCUMENTOS QUE NECESITAN SIMPLEMENTE BUSQUEN LO ADECUADO Y ASÍ PODRAN ESCRIBIR SUS DOCUMENTOS. NO SE OLVIDEN REVISAR SIEMPRE LA NORMA CON LA CUAL TRABAJARAN Y LEERLO CON CUIDADO PARA CUMPLIR CON LOS REQUISITOS QUE SE DEBEN CUMPLIR. PODRIAN SUGERIR TAMBIEN QUE EN SU LABORATORIO SE REALICEN CURSOS ESPECIFICOS SOBRE DOCUMENTACION DE ACUERDO A SUS NECESIDADES. EN CUANTO A QUIEN APRUEBA LOS DOCUMENTOS: EL MANUAL DE CALIDAD Y EL MANUAL DE FUNCIONES DEBEN SER FIRMADOS POR LA MAXIMA AUTORIDAD DE LA INSTITUCION QUE GENERLAMENTE ES EL DIRECTOR O DIRECTORA. EL RESTO DE LOS DOCUMENTOS PUEDEN SER APROBADOS POR EL JEFE DE LABORATORIO. MUCHAS GRACIAS. Atte. Jose Luis Cortez C. Cel. 72084828 Email: [email protected]