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El estrés impuesto por los rayos gamma, peróxido de hidrógeno y calor es amortiguado por cambios en la expresión y localización de la HSP70 en células HeLa The stress apprised for gamma ray, hydrogen peroxide and heat is muffled for changes in the expression and localization of HSP70 in HeLa cells Autores: Sergio H. Sánchez-Rodríguez*, Elena D. Ramírez Alvarado**, Olga Y. Barbosa Cisneros*** * Doctor en Ciencias (Fisiología). Departamento de Biología Celular. Unidad Académica de Biología Experimental. Universidad Autónoma de Zacatecas. ** Q.F.B. Departamento de Biología Celular. Unidad Académica de Biología Experimental. Universidad Autónoma de Zacatecas. *** Doctora en Ciencias (Fisiología). Departamento de Biología Celular. Unidad Académica de Biología Experimental. Universidad Autónoma de Zacatecas. Contacto: Dr. Sergio Hugo Sánchez Rodríguez. Departamento de Biología Celular. Unidad Académica de Biología Experimental. Universidad Autónoma de Zacatecas. Fernando Villalpando #80, Col. Ramón López Velarde. Guadalupe, Zacatecas, México. C.P. 98600. Tel/Fax (492) 921-13-26. email:
[email protected]
anticuerpo monoclonal contra la Hsp70.
Resumen: Para producido
determinar en
células
el
estrés
HeLa
Los resultados presentan que los rayos
por
gamma, el peróxido de hidrógeno y el
exposición a radiación ionizante (rayos gamma),
peroxido
de
hidrógeno
calor
y
células
calor, hemos enfocado el estudio a la
respuesta
se
través
de
la
en función al tiempo de exposición a los
la exposición a varias formas de estrés.
rayos gamma. El nivel de expresión de
En el presente estudio, se observó el
Hsp70 por radiación gamma es muy
efecto estresante producido por los
similar al producido por el peróxido de
rayos gamma, el peróxido de hidrógeno
hidrógeno, mientras que con calor el
y el calor, a través de la expresión de la
daño es mas severo con un cambio en
Hsp70 en células HeLa. Las proteínas
la
de las células HeLa estresadas fueron
distribución
de
la
Hsp70
de
la
fracción soluble a la insoluble a 42°C.
caracterizadas por PAGE-SDS, Western con
a
en
La cantidad de Hsp70 expresada, está
células y su síntesis se incrementa con
inmunodetectadas
cuya
estresantes
sobreexpresión de la proteína Hsp70.
la cual, es constituyente normal en las
e
factores
HeLa,
manifiesta
proteína de choque calórico 70 (hsp70),
blot
son
Palabras clave: HeLa, Estrés, Rayos
un
Gamma, Calor, Peróxido de Hidrógeno.
1
Arch Med 2007; 3(3)
Archivos de Medicina © - http://archivosdemedicina.com Key
Abstract: To
determine
produced
in
HeLa
radiation
(gamma
the
cells rays),
HeLa,
Stress,
Gamma
Rays, Heat, Hydrogen Peroxide.
stress
for
words:
ionise
hydrogen
peroxide and heat, we have focused this study in the heat shock protein 70 (Hsp70), which is regular component of the cells and their synthesis increases exposure to several forms of stress. In the
present
study,
observed
the
stressing effect produced by gamma rays,
hydrogen
peroxide
and
heat,
through the expression of Hsp70 in HeLa cells. Proteins of stressed HeLa cells were characterized by PAGE-SDS, Western blot and immunodetected with antibodies against Hsp70. The results showed that low intensity gamma rays, hydrogen peroxide and heat are stress factors in HeLa cells, the which is manifest with the over expression of the protein Hsp70. The level of Hsp70 by gamma radiation is very similar to exposition to hydrogen peroxide, while with heat, the damage is more severe with a change in the Hsp70 distribution of the soluble fraction to the insoluble at 42ºC.
2
Arch Med 2007; 3(3)
Archivos de Medicina © - http://archivosdemedicina.com la degradación de proteínas anormales.
Introducción para
La capacidad de los organismos
[7,8,9]
enfrentar
inducidas
cambios
y
sobrevivir
adversos
ambiente,
en
representa
a
su
los
Las
proteínas por [10]
estresantes,
medio
de
estrés
varios
son
agentes
entre los que están: la
un
aspecto
hipoglucemia, la anoxia, el calor, el frío,
integral de la evolución. En
el reino
el etanol, el peróxido de hidrogeno,
animal, existen numerosos ejemplos de
iones de metales pesados, arsenicales,
organismos, los cuales han utilizado
infecciones con ciertos virus,
vías únicas que les permiten continuar
radiación
sobreviviendo en un medio ambiente
electromagnética de baja frecuencia,
hostil
los
e
incompatible
con
el
ultravioleta,
campos
la
intensos
[14,15]
[11,12,13]
la
radiación
de
radiación
sostenimiento de la vida. La respuesta
ionizante
celular
radiación gamma de baja intensidad.
de
los
organismos
a
estos
y
los
campos
de
[16]
cambios en su medio ambiente, es a través de las proteínas de choque
En el estudio de los riesgos
calórico (hsp) que proveen protección a
generados por la exposición a niveles
la
bajos
célula
durante
y/o
después
de
recobrarse de la agresión del medio ambiente.
de
radiación
ionizante
naturaleza ambiental o artificial,
[1,2]
ha
encontrado
radiación
Las proteínas de choque calórico
que
bajas
ionizante
[17]
dosis
benefician
de se de el
y/o chaperonas moleculares se induce
crecimiento, desarrollo y fertilidad de
su expression en respuesta a señales
animales, así mismo coadyuvan a su
estresantes y son esenciales en el
longevidad, siendo estos efectos, una
control y regulación de la apoptosis así
medida de ajuste a las condiciones
como, en el crecimiento normal de las
ambientales.
células.
[3]
Las
Hsp,
incluidas
las
[18]
La radiación cuando interacciona
chaperonas moleculares, se expresan
con
de manera constitutiva y ubicua en las
particular
los
sistemas con
biológicos,
las
células
y
en
que
los
[4,5,6]
constituyen, se da en: 1). Membrana,
En condiciones adversas, la función de
provocando alteraciones osmóticas; 2).
éstas proteínas es proteger a la célula
Citoplasma,
del
estrés,
ionizante interacciona con la molécula
proteínas
de agua produciendo iones o radicales
células eucariotas y procariotas.
daño
mediante
producido la
por
unión
parcialmente
a
el
libres,
desnaturalizadas,
y
donde
pueden
disociando agregados de proteínas y
peróxido
regulando
hidroxiperóxido
el
doblez
correcto
y
la
de
la
llegar
radiación
a
producir
hidrógeno
o
hiperoxidante,
traslocación intracelular de proteínas
compuestos altamente tóxicos; 3). En
sintetizadas de novo, así como, facilitar
núcleo,
3
puede
en
algunos
casos,
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Archivos de Medicina © - http://archivosdemedicina.com radiación gamma, la cual, genera por
romper la molécula de DNA y alterar su función.
[19]
La
ionización radiación
ionizante
radicales
consecuente
al
libres
formación
de
con
la
agentes
interaccionar con la célula, produce
oxidantes, así mismo, comparar este
proteínas desnaturalizadas debido a la
estrés con un agente oxidante conocido
ionización de la molécula de agua y a la
como es el peróxido de hidrógeno y
generación de radicales libres, por lo
otro estresor como es el calor que se
que el estrés en la célula induce un
conoce que induce la sobreexpresión de
incremento
la hsp70.
en
la
expresión
de
las
[26]
Hsp70; lo anterior ha sido reportado para dosis gamma de 400 y 1000 Gy. [20]
Se ha visto en células de ratón que
al ser expuestas a campos de radiación ionizante se presenta el fenómeno de apoptosis, debido a que se expresan proteasas especificas para histona H1 con la consecuente fragmentación del DNA.
[21]
En
timocitos
de
ratones
BALB/c cuando son irradiados, la hsp70 juega un papel citoprotector al regular la no expresión de la proteína p53 y Bax,
ambas
involucradas
apoptosis celular ; esplenocitos
de
[22]
en
la
mientras que en
ratón,
cuando
son
sometidos a un preacondicionamiento a bajas dosis de radiación gamma (15 cGy) y posteriormente se someten a dosis más altas (6 Gy) existe una reducción
de
la
muerte
celular
(apoptosis) debido a una respuesta adaptativa a través de la hsp70.
[23]
Debido a que el papel principal de las Hsp es proteger a los organismos de los efectos tóxicos del calor y otras formas de estrés,
[24,25]
en el presente
estudio nos enfocamos a estudiar el papel de la hsp70 cuando las células HeLa son estresadas con dosis bajas de
4
Arch Med 2007; 3(3)
Archivos de Medicina © - http://archivosdemedicina.com Material y métodos
determinar
Línea celular y cultivo: Las células HeLa
proteínas Hsp sintetizadas durante el
(células
estrés, las células se colocaron en un
epiteliales
de
humano)
se
la
obtuvieron de la American Type Culture
medio
Collection. Estas células se sembraron
marcada
en
Laboratories,
medio
suplementado
de
cultivo
con
100
DMEM U/ml
de
de
expresión
cultivo
England,
con 35
con
de
nuevas
metionina
S
(Amersham
Buckinghamshire,
UB2688),
cuya
actividad
5
penicilina, estreptomicina 100 μg/ ml
específica fue de 1.85x10 Bq/ml.
(In
Lisis
Vitro,
México),
0.08
U/ml
de
celular:
Después
de
los
insulina (Eli Lilly, México, D.F.) y 10 %
tratamientos estresantes, las células se
de
BRL,
lavaron con 1 ml de solución buffer
Grand Island, N.Y. 16000-028), a 37°C
fosfato (PBS) frío pH de 7.2 (Gibco BRL,
en
desechables
Grand Island NY, USA, 21300-058), se
(Costar 3151, Cambridge, Ma.) con una
lisaron con 200 μl de una solución de
atmósfera de 5% de CO2 y 95%
lisis que contiene: Tritón X-100 al 1%,
humedad
(Merck West Germany), NaCl 140 mM,
suero
fetal
botellas
Bovino
de
plástico
relativa.
sembradas
a
despegaron
del
(Gibco
Las
células,
confluencia,
se
EDTA 1 mM, Tris-HCl 10 mM pH 7.6
una
(Gibco BRL Grand Aisland NY), mas 1
solución de tripsina al 0.05% y EDTA al
mM de PMSF (sigma chemical Co, St
0.05% (In Vitro, México, D.F.), se
Louis MO, USA).
resuspendieron
centrifugó por 10 minutos a 14000 rpm
sustrato
en
con
CDMEM
y
se
3
sembraron a confluencia (5X10 células
recuperándose
por cm2 ) en cajas de cultivo.
(fracción
[27]
[28]
El lisado celular, se
el
soluble)
sobrenadante
y
el
precipitado
Estrés celular y marcaje metabólico:
(fracción insoluble).
Para
Determinación de proteínas: Mediante
inducir
la
expresión
de
las
[29]
proteínas de choque calórico Hsp70, las
el método de Bradford (1976).,
células HeLa incubadas a 37°C, se
determinó la cantidad total de proteína
expusieron
de cada condición experimental para su
a
un
campo
de
rayos
gamma de 0.03 cGy-h -1 proveniente de
una
fuente
de
137
Cs,
a
posterior
caracterización
por
se
PAGE-
SDS.
cuatro
diferentes tiempos: 30, 40, 50 y 60
Electroforesis en geles de poliacrilamida
min. Así mismo, otro lote de células se
(PAGE-SDS):
estresaron con calor manteniéndolas
mediante
Se
la
realizó
técnica
al
10%,
descrita
por
[30]
por 1 hora a diferentes temperaturas:
Laemmli (1970).
37, 40, 42 y 44 ºC; otro conjunto de
Inmunotransferencia: Las proteínas en
células se estresaron con peróxido de
los
hidrógeno a una concentración de 800 y
transfirieron
1200 μM durante 1 hora a 37°C. Para
nitrocelulosa, (Amersham Hybond-C #
5
geles
de a
poliacrilamida, una
membrana
se de
Arch Med 2007; 3(3)
Archivos de Medicina © - http://archivosdemedicina.com RPN303C),
utilizando
Towbin et al. (1979).
la
técnica
de
Autoradiografía
[31]
Inmunodetección:
El
membrana papel
de
y
Densitometría:
de
expuesta
La
nitrocelulosa
a
una
fue placa
nitrocelulosa conteniendo las proteínas,
radiográfica(Eastman
se
Rochester, NY, USA, 870-1302) por 45
incubó
por
24
h.
en
solución
bloqueadora (3% de leche descremada
días,
Sbelty de Nestlé en PBS). Después, la
proteínas
con
el
fin
Kodak
de
marcadas
35
Co,
visualizar
las
radioactivamente
membrana de nitrocelulosa se lavó 3
( S-metionina).
Las
veces con solución de PBS. Luego se
obtenidas
con
la
incubó por 1 h. con un anticuerpo
metionina
y
las
monoclonal contra la Hsp70 (Sigma
inmunoblot
con
Chemical, St Louis, USA, H-5147), para
utilizando
después lavarse en forma alternada por
(Eagle
5 veces con solución de PBS y PBS-
Para determinar la cantidad de proteína
Tween-20.
sintetizada de nuevo durante el estrés,
Posteriormente,
la
un
Eye,
autoradiografías marca
de
reveladas
ECL,
fueron
densitómetro Estategene
35
35
S-
por leídas óptico
Mitsubishi).
membrana se incubó durante 1 h. con
el valor obtenido de
un segundo anticuerpo conjugado a
el obtenido por ECL.
peroxidasa (Sigma Chemical, St Louis,
Análisis estadístico: A cada banda de
USA, A-9044). Pasado el tiempo de
proteína Hsp70 obtenida por Western
incubación, se procedió a lavar en la
blot bajo las condiciones de estrés por
forma
radiación,
anteriormente
señalada,
para
peróxido
S se dividió entre
de
hidrógeno
y
después agregar a la membrana, un
calor, se le realizó densitometría, y a
reactivo
los valores
quimioluminiscente,
(Amersham
ECL
Laboratories,
numéricos obtenidos de
esta, se le obtuvo la media y su
Buchinghamshire, England, RPN2106),
desviación.
que al reaccionar con la peroxidasa emite luz, la cual, se detectó mediante una
placa
fotográfica
(Dupont
de
Neumors USA). Para el revelado de la película se utilizó revelador Kodak GBX # 616-0832 y fijador Kodak GBX # 616-2911.
6
Arch Med 2007; 3(3)
Archivos de Medicina © - http://archivosdemedicina.com su reparación y con ello proteger a la
Resultados y discusión En
el
presente
trabajo,
célula del agente estresor en cuestión.
se
estudió el efecto estresante producido
[8,33]
en células HeLa por los rayos gamma,
en el preacondicionamiento a cierto
el peróxido de hidrógeno y el calor, a
agente estresante, debido a que la
través de la expresión de la hsp70. La
inducción de la Hsp70 se correlaciona
tolerancia
con
que
presentan
los
organismos a un agente estresante, puede ser natural o inducida,
[8]
Además, la Hsp70 es fundamental
la
protección
subsecuentes.
a
daños
[11,34,35]
donde
La sobreexpresión de la hsp70
participa la síntesis de las Hsp como un
también se explica por la formación de
mecanismo de respuesta celular.
[32]
radicales libres generados a partir de la molécula de agua vía radiólisis; dichos
Las células HeLa en condiciones normales manera Hsp70,
de
cultivo,
constitutiva y
campos
cuando
de
de
radicales libres se unen y forman entre
proteína
otros, moléculas reductoras como el
expresan a
la
son
radiación
expuestas gamma,
peróxido de hidrógeno que producen la
a
desnaturalización
se
éste
de
las
proteínas,
incrementa su expresión. La cantidad
siendo
mecanismo
de
de Hsp70 expresada en las células
desnaturalización, el que dispara la
HeLa, está en función al tiempo de
respuesta al estrés a nivel celular con la
exposición a los rayos gamma (Figura
consecuente expresión de las Hsp.
[36]
1, Tabla 1, Figura 2B). Esta misma Condición
respuesta celular, se ha observado en
Cantidad Relativa de
linfocitos humanos expuestos a campos bajos
de
radiación
gamma [20]
campos más intensos.
[16]
Proteína Hsp70
y
Control
Se conoce
Peróxido de Hidrógeno (800
de
péptidos
proteínas
y
estrés,
es
unirse
dañadas
Peróxido de Hidrógeno
a
C
A
B
30’
40’
50’
11.28 ± 0.65
(5)
12.51 ± 0.37
(5)
(1200 μM)
para
evitar su agregación, contribuyendo en Condición
(5)
μM)
que una de las funciones de la hsp70 en condiciones
4.25 ± 0.18
60’
Rayos γ (t = 30 minutes)
4.23 ± 0.11
(5)
Rayos γ (t = 40 minutes)
7.49 ± 0.19
(5)
Rayos γ (t = 50 minutes)
10.98 ± 0.16
(5)
Rayos γ (t = 60 minutes)
13.03 ± 0.13
(5)
Tabla I. Valores relativos de proteína Hsp70 70 kDa
expresada en células HeLa con dos estresores,
Figura 1. Inmunodetección: ECL. Expresión de la
rayos gamma y peróxido de hidrógeno. Estos
proteína Hsp70 en células HeLa expuestas a rayos
valores fueron obtenidos por densitometría de
gamma y peróxido de hidrógeno. C (Células
cada banda de proteína obtenida por Western
control). A y B (Células tratadas con 800 μM y
blot (Figura 1).
1200 μM de peróxido de hidrógeno). 30, 40, 50, 60 minutos (células expuestas a un campo de rayos gamma).
7
Arch Med 2007; 3(3)
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B
A
así, las células HeLa se sometieron a
Expresión de la Hsp70 por peróxido de hidrógeno
Expresiónde la Hsp70 por radiacióngamma
diferente temperatura, encontrando un
15
20
10
10
5
incremento de la Hsp70 conforme se
0
0 Control
Cont rol
Hyd. Pe. 800
Hyd. Pe. 1200
4.2
11.2
12.5
aumentaba la temperatura (Figuras 3,
Gamma30 Gamma40 Gamma50 Gamma60 4. 2
4. 6
7. 4
10.9
13. 0
tabla 2). Figura 2. Expresión de Hsp70 en células HeLa. (A) Estresadas
con
peróxido
Estresadas
con
rayos
fueron
obtenidos
por
de
hidrógeno.
gamma.
Estos
densitometría
Cond. ºC
(B)
37
40
42
44
37
40
42
44
valores de
70 kDa
cada
banda de proteína obtenida por Western blot
Soluble
(Figura 1, Tabla 1)
Figura 3.
Insoluble
Inmunodetección: ECL. Expresión de la
proteína Hsp70 en células HeLa estresadas con calor. Fueron analizadas tanto la fracción soluble como la
Para demostrar en este trabajo lo
antes
reportado
y
hacer
insoluble de cada extracto celular. 37ºC (Células
una
control), 40, 42, 44ºC (Células estresadas con calor).
correlación entre el estrés por radiación gamma y el inducido por un agente oxidante,
las
células
HeLa
Es
fueron
fenómeno
expresión de la proteína Hsp70. El nivel Hsp70
se
estresadas
incrementó
mientras
conforme se aumentó la concentración
(1997). que
reportado [37]
la
por
Cotto
et
reportado con
en
hipertermia,
que
con
[11,26,34]
peroxido
de la radiación con la molécula de agua,
Con lo anterior, observamos
sobreexpresión
de
hsp70
Condición
Cantidad Relativa de Hsp70
Control Soluble
similar al encontrado por rayos gamma. se
ha
sobrexpresión
de
reportado, las
Hsp
que
la
confiere
4.25 ± 0.18
(5)
Soluble
40°C
37°C
44.07 ± 0.52
(5)
Soluble
42°C
6.58 ± 0.90
(5)
Soluble
44°C
59.13 ± 1.10
(5)
protección contra la acción del peróxido
Control Insoluble
de hidrógeno (H2O2) y de oxiradicales
Insoluble 40°C
3.60 ± 0.13
generados por drogas anticancerígenas.
Insoluble 42°C
53.23 ± 0.66
[12,13, 38 – 42].
Insoluble 44°C
5.64 ± 0.14
En
de
recordando que durante la interacción
al.
inducida con peroxido de hidrógeno, es También
células
similar al encontrado por rayos gamma,
tabla 1, Figura 2A), que es congruente lo
un
hidrógeno, el nivel de expresión es
de peróxido de hidrógeno (Figura 1, con
existe
las células son estresadas con calor,
donde se observó, un incremento en la proteína
que
incremento mayor de la hsp70 cuando
estresadas con peróxido de hidrógeno,
de
evidente
el
presente
(5) (5) (5)
Tabla II. Valores relativos de expresión de la
estudio,
proteína Hsp70 en células HeLa estresadas con
utilizamos un estresor control como es
calor.
el calor, el cual, se conoce que induce
densitometría
la sobreexpresión de la hsp70,
1.39 ± 0.13
Estos
valores de
fueron
cada
banda
obtenidos de
por
proteína
obtenida por Western blot (Figura 3).
[26,43,44]
8
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Archivos de Medicina © - http://archivosdemedicina.com se
producen
radicales
libres
y
utilizados, no inducen un daño severo
la
subsiguiente producción de peróxido de
que
induzca
un
gran
cantidad
hidrógeno en la célula, por lo que
proteínas desnaturalizadas.
de
podemos decir que las concentraciones
En cambio con calor, estresor
usadas de peroxido son suficientes para
utilizado en el presente estudio como
inducir un daño similar al encontrado
control, ya que un inductor de la
por el estrés producido por la radiación
expresión
gamma en las células HeLa.
observó que en la fracción soluble, la
de
la
[26,43,44]
hsp70,
se
Con el fin de determinar, si los
hsp70 solo se encontró a los 37, 40 y
agentes estresantes utilizados en el
44ºC, existiendo una ausencia de la
presente
la
Hsp70 a los 42°C, mientras que en la
desnaturalización de proteínas celulares
fracción insoluble, la hsp70 solo se
y con ello cambio en sus propiedades
encontró a 42ºC (Figura 4).
bioquímicas
trabajo
de
inducían
ser
solubles
en
su Expresión de Hsp70 por calor
estado nativo e insolubles cuando se desnaturalizan,
con
un
consecuente
80
cambio en la localización de la hsp70,
20 0
la ayuda tanto a proteínas solubles pero mayor
proporción
desnaturalizadas
o
a
Cont r ol
proteínas
insolubles;
Fracción insoluble
40
ya que esta asiste durante el estrés en en
Fracción soluble
60
40
42
4.2
44.0
6.5
58.3
44
1. 3
3.6
53.2
5.6
razón
por la cual, las células HeLa estresadas
Figura. 4. Behavior of Hsp70 in HeLa cells
por
stressed with heat. Blue line is Hsp70 in soluble
rayos
gamma,
peróxido
de
fraction; Pink line is Hsp70 in insoluble fraction.
hidrógeno y calor, se les analizaron
Estos valores fueron obtenidos por densitometría
cambios en la localización de las Hsp
de cada banda de proteína obtenida por Western
tanto en la fracción soluble como la
blot (Figura 3, Tabla II).
insoluble, en donde se encontró: La radiación gamma y el peroxido de
Lo anterior nos muestra que
hidrógeno inducen un incremento de la
existe
hsp70 en las células HeLa a nivel de
proteínas a los 42ºC, donde la Hsp70 se
fracción soluble (datos anteriormente
encuentra asociada a ellas, y que de
descritos). En el caso de la fracción
alguna
insoluble, al analizar la localización y
características
expresión de la proteína Hsp70, ésta no
solubles, encontrándolas solamente en
se encontró en células estresadas con
la
radiación gamma y con peróxido de
dañadas por el calor son reparadas y
hidrógeno,
éstos
otras degradadas a través de las Hsp, y
concentración
debido a esta función, es por lo que se
estresores
indicándonos al
nivel
y
que
9
un
daño
manera
fracción
importante
han
perdido
bioquímicas
insoluble.
en
Las
de
las
su ser
proteínas
Arch Med 2007; 3(3)
Archivos de Medicina © - http://archivosdemedicina.com observan cambios en la localización y
Hsp70 por rayos gamma, es similar al
sobreexpresión de la Hsp70 en las
producido por el peróxido de hidrógeno,
fracciones soluble e insoluble, ya que se
mientras con calor, el daño es más
ha visto, que las Hsp protegen a la
severo con un cambio en la distribución
célula durante el estrés, facilitando la
de la hsp70 de la fracción soluble a la
reparación o degradación de proteínas
insoluble a los 42°C.
dañadas
después [45]
estresante.
de
un
Estudios
evento
hechos
en
Agradecimientos
mitocondrias se ha encontrado algo
Proyecto apoyado por CONACYT al Dr.
similar,
Sergio
donde
protege
el
choque
térmico
selectivamente
mitocondrias
con
una
a
las
Hugo
Sánchez
Rodríguez.
Contrato: 499100-5-I31456-N.
correlación
estrecha entre el grado de protección
Referencias
mitocondrial
de
1. Welch WJ, Kang SH, Beckmann PR,
es
Mizzen AL. Response of Mammalian
a
Cells to Metabolic Stress: Changes
y
[46]
Hsp70.
confirmada
la
concentración
Esta en
protección
ratas
expuestas
choque térmico previo a una perfusión
in
cardiaca con peróxido de hidrógeno,
Structure/Function
donde
Proteins.
provocó
aumento
concentración de la Hsp70.
en
la
[47]
Cell
Physiolgy
Es necesario realizar estudios
of
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molecular
todo, ver con que tipo de proteínas
misfolded
sensibles a calor se encuentra asociada
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shock
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molecular
es a través de la expresión de la
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