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Respuesta de T. spiralis a cambios bruscos de temperatura y pH a través de las Hsp25, 60, 70 y 90 Response of T. Spiralis to abrupt changes of temperature and pH through of Hsp25, 60, 70 and 90 Autores: Luna Sánchez B*, Barbosa Cisneros OY**, Reveles-Espinoza AM***,
Quiñonez-Bañuelos G****, Sánchez-Rodríguez SH***** * Q.F.B. ** Doctora en Ciencias (Fisiología). *** Estudiante de Q.F.B. FCQ-UAZ. **** Estudiante de Q.F.B., FCQ-UAZ. ***** Doctor en Ciencias (Fisiología). Departamento de Biología Celular. Unidad Académica de Biología Experimental. Universidad Autónoma de Zacatecas. Correspondencia: Dr. Sergio Hugo Sánchez Rodríguez. Fernando Villalpando #80, Col. Ramón López Velarde. Guadalupe, Zacatecas, México. C.P. 98600. Tel/Fax (492) 923-00-57. E-MAIL:
[email protected]
1
Arch Med 2007; 3(5)
Archivos de Medicina © http://archivosdemedicina.com Resumen
Abstract
Las proteínas de choque calórico
Heat
shock
proteins
(Hsp)
are
(Hsp) se expresan de manera constitutiva
expressed of constituent way in all the cells
en todas las células de un organismo y se
of an organism and they are over expressed
sobreexpresan por una gran variedad de
by stress caused by a great variety of
agentes estresantes como alteraciones en la
agents, like temperature and pH. Trichinella
temperatura y el pH. Trichinella spiralis es
spiralis is a nematode that infects the
un nematodo que infecta el músculo de
muscle in most of the mammals caused
prácticamente
y
Trichinelosis diseased. In the present study
llamada
was determined the degree of expression of
Triquinelosis. En el presente estudio se
different size of proteins Hsp25, 60, 70 y 90
determinó, la expresión de las Hsp25, 60,
when T. spiralis is force under different
70 y 90 cuando el nematodo T. spiralis es
temperature and pH conditions. T. spiralis
sometido a diferente temperatura y pH. T.
were obtained from Long Evans rats by
spiralis se obtuvo de ratas Long Evans por
artificial digestion, later they were incubate
digestión artificial, posteriormente fueron
under different temperatures 40, 21, 4, 0, -
sometidos a temperatura de 40, 21, 4, 0, -
20, -50°C and diverse pH conditions of 2,
20, -50°C y pH de 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9.
3, 4, 5, 7, 8, 9. The samples were process
Después,
para
for indirect immunofluorescence, analyzed
inmunofluorescencia, PAGE-SDS y Western
by PAGE-SDS and Western blot. Results:
blot. Se encontró: T. spiralis expresa en
T.spiralis
condiciones
temperatura
temperature of 21°C expresses Hsp25, 70
(21°C) a las hsp25, 70 y 90, con un
and 90, however there is an increase of
incremento en la expresión de la hsp25
Hsp25
cuando el nematodo es estresado a bajas
stressed
temperaturas, mientras que a altas su
expression
expresión disminuye; la hsp70 y 90 se
temperatures conditions; the expression of
incrementa
es
Hsp70 and Hsp90 increase when nematode
estresado a altas y bajas temperaturas. Así
is stressed in high and low temperatures.
mismo, se observó la expresión de la hsp60
Our results show also the expression of
a
spiralis
Hsp60 in low temperatures of -50 ºC. T.
sometida a diferente pH reveló, que las
spiralis submit to different pH revealed that
Hsp25, 70 se sobreexpresa a un pH tanto
Hsp25 and 70 are over expressed to acidic
ácido como básico, mientras que la hsp90
and basic pH, while Hsp90 is only over
solamente se sobreexpresa a un pH ácido y
expressed to acidic pH and decrease its
disminuye su expresión a un pH básico.
expression to a basic pH. Conclusion: T.
Conclusión: T. spiralis sobrevive a cambios
spiralis
bruscos de temperatura y pH ayudado por
temperature and pH, supported by the
la expresión de las Hsp25, 60, 70 y 90.
expression of Hsp25, 60, 70 and 90.
Palabras clave: T. spiralis, proteínas de
Key words: T. spiralis, Heat shock protein,
estrés calórico, temperatura, pH
Temperature, and pH
provoca
todos
la
los
enfermedad
fueron
procesados
normales
cuando
temperatura
mamíferos
de
de
el
nematodo
–50°C.
T.
2
in
normal
expression to
low
when
to
at
nematode
temperatures
decrease
survives
conditions
and
under
abrupt
is the high
changes
of
Archivos de Medicina © http://archivosdemedicina.com Introducción
que
le
confiere
resistencia
para
Las Zoonosis son enfermedades
sobrevivir a cambios adversos en su
transmisibles entre los animales y el
medio ambiente local, principalmente a
hombre. [1,2] La triquinelosis fue descrita
diferente temperatura y cambios en el
[3]
una
pH. Para ello nos enfocamos al estudio
enfermedad parasitaria causada por el
de las proteínas de choque calórico
nematodo Trichinella spiralis, infecta el
(Hsp), que se expresan de manera
músculo de prácticamente todos los
constitutiva en todas las células tanto
mamíferos, se ha reportado en casi
procariotas
todo el mundo, su prevalencia es alta
[9,10,11,12,13,14]
en Europa y Asia. La enfermedad en el
Estas
por
Owen
en
1835,
es
como Hsp
eucariotas.
se
sobreexpresan
ser humano, se asocia con la ingesta de
cuando ocurren cambios en el medio
carne infectada y sus productos crudos
ambiente local de las células de todos
o mal cocidos, sobre todo de cerdo.
los organismos tanto inferiores como
[4,5,6,7]
superiores, es decir, se sobreexpresan
El ciclo biológico de T. spiralis en
[15,16]
mamíferos incluye 3 estadios; adultos,
en respuesta al estrés.
larva
los estresores que inducen la síntesis
recién
nacida
infectante (LI).
(LRN)
y
larva
[4,8]
de las Hsp están: la hipoglucemia, la anoxia, el calor, el etanol, el peróxido
Se ha observado que T. spiralis sobrevive adversos
a
cambios
como
temperatura
Dentro de
son
cuando
de
ambientales
iones
de
metales
baja
de
pesados, arsenicales, infecciones con
animal
es
ciertos
una el
hidrógeno, virus,
[17,18]
enfermedades
sacrificado, cuando la carne infectada
autoinmunes como el lupus eritematoso
es
sistémico,
almacenada
ya
sea
por
los
[19]
[20]
por privación de agua y
comerciantes o las amas de casa a 4 y
alimento,
–20°C, además, T. spiralis sobrevive a
radiación
temperaturas de cocción y freído, y
frecuencia y los campos intensos de
más aún, sobrevive a cambios drásticos
radiación
de pH en su paso por tracto digestivo
gamma de baja intensidad, entre otros.
del
[23]
huésped
al
infectarlo,
en
el
radiación
ultravioleta,
electromagnética gamma,
[21,22]
de los
baja rayos
La función de las Hsp es proteger a
entendido de que no solo tiene una
la célula del daño producido por el
gran
estrés, mediante la unión a proteínas
capacidad
de
supervivencia
a
cambios adversos, sino que presenta
parcialmente
una
disociando agregados de proteínas y
alta
infectividad,
causando
enfermedad.
regulando
propusimos
analizar
doblez
correcto
y
la
traslocación intracelular de proteínas
Por lo anteriormente descrito, nos
el
desnaturalizadas,
sintetizadas de novo.
las
características fisiológicas de T. spiralis
3
[24]
Archivos de Medicina © http://archivosdemedicina.com La
familia
altamente
de
las
conservada
Hsp
en
está
todos
han
los
desarrollado
supervivencia
estrategias
de
morfológicas
y
organismos. Se han clasificado en seis
fisiológicas. Algunos autores indican un
familias
peso
importante papel de las Hsp en los
molecular: a).- Las Hsp de 100-110
cambios morfológicos del parásito y en
kDa, b).- Las Hsp de 83-90 kDa. c).-
su resistencia a estresores.
Las Hsp
inducción
de
acuerdo
a
su
de 66-78 kDa, d).- Las Hsp
de 60 kDa, e). Las Hsp de 40 kDa, f).Las
Hsp
pequeñas
de
13-25
de
las
[37,38,39,40]
Hsp
ha
La
sido
relacionada incluso con el incremento
kDa.
de la virulencia en algunos parásitos.
[13,14,25,26]
[41,42]
En el contexto fisiológico, las proteínas
Hsp
juegan
un
Las fluctuaciones en el nivel de
papel
Hsp están relacionadas con la viabilidad
importante en el mantenimiento de la
e infectividad de las larvas, ya que en
homeostasis celular bajo condiciones
condiciones de estrés, la homeostasis
normales, como condiciones de estrés.
es sostenida a través del incremento en
[9,26,27,28]
el nivel de Hsp70, cuando se pierde la
Bajo condiciones normales, las
Hsp tienen influencia en la síntesis,
infectividad,
transporte y degradación de proteínas;
alterados
considerablemente,
[29,30]
homeostasis
puede
bajo condiciones de estrés, actúan
como moléculas chaperonas. señalar
que
chaperonas
la
[31]
moleculares
no
ser
la
perdida
puesto que la viabilidad no decrece. El
Cabe
sobreexpresión
los niveles de Hsp son
decremento en los niveles constitutivos
de
de
incluyendo
Hsp70
y
Hsp90
puede
ser
un
miembros de la familia de Hsp70 y
indicador de muerte celular programada
pequeñas
conocida como apoptosis.
proteínas
de
estrés
en
[43]
De hecho
Drosophila y C. elegans han mostrado
la inducción de Hsp70 y Hsp90 ha sido
que extienden la duración de la vida de
asociada
con
una
supresión [44,45]
de
estos organismos. Además, recientes
apoptosis en muchos estudios.
estudios han implicado a los factores de
clara la relación existente entre la
shock térmico (HSF) como reguladores
reducción en los niveles de Hsp70 y
de la longevidad.
[32,33,34]
Hsp90 y el decremento de la viabilidad e infectividad de las larvas.
Proteínas Hsp en T. spiralis Se
conoce
que
Es
los
parásitos
Además, en algunos estudios se
están sometidos a varios estresores
ha observado que a temperaturas bajas
impuestos por el huésped; una vez que
se reduce el efecto perjudicial del estrés
han penetrado en él, hay condiciones
oxidativo; el calor no induce incremento
adversas como el calor o ambientes
en
oxidativos que deben ser superados;
reduce la infectividad; incrementos en
[35,36]
los niveles de Hsp inducidos por estrés
por consiguiente estos parásitos
4
los
niveles
de
Hsp60/Hsp70
ni
Archivos de Medicina © http://archivosdemedicina.com oxidativo
pueden
infectividad.
causar
o resolución de una parasitosis durante
baja
[46]
el
[52]
tratamiento.
En
un
reciente
la
estudio de expresión de Hsp60, Hsp70
termotolerancia, a bajas temperaturas
y Hsp90 en órganos de ratas con re-
Trichinella
infección de Trichinella spiralis,
Con
respecto spp,
a
tiene
varias
implicaciones, una de ellas es que las LI
observó
que
[56]
se
a
la
[52]
no
contrariamente
de todas las especies deben tener una
infección primaria de las ratas
habilidad para resistir la exposición a
exhiben
temperaturas bajas, que ocurre en un
expresión de Hsp. La insensibilidad de
huésped infectado después de muerto.
las
De hecho, la biología de la Trichinella y
parece
su distribución a nivel mundial sugieren
inmunidad adquirida. Con lo anterior es
que
tolerancia
probable que las Hsp60, Hsp70 y Hsp90
genéticamente determinada a cambios
sean el blanco de la respuesta inmune
de temperatura según la región. Hay
del huésped en la infección por este
Trichinella
nematodo.
la
LI
tiene
spp
una
típicas
de
ciertas
ningún
Hsp
en estar
las
aumento ratas
en
la
re-infectadas
relacionado
con
la
[50]
regiones, por ejemplo, en el ártico T.
En el proceso de infección, las
nativa, en ambiente tropical T. nelsoni,
Hsp de los parásitos, juegan un papel
y la T. spiralis, cosmopolita.
[47,48]
central en la adaptación y diferenciación del parásito y en la protección de los
Las Hsp a pesar de su naturaleza ser
mecanismos de muerte del hospedero al
Por lo
parásito, como son metabolitos reactivos
anterior y debido a todas sus funciones
y bajo pH. Mas aún, las Hsp del parásito
vitales,
Trichinella
altamente
conservada,
pueden [49,50]
altamente inmunogénicas. las
Hsp
marcadores
se
utilizan
como
conocida como una proteína altamente
de daño por estrés en
enfermedades,
[51,52,53]
eficacia de drogas, constituyente
de
cuantificación
en estudios
[55]
ecotoxicológicos,
inmunogénica.
en estudios de
[54]
y
vacunas.
seguida
por
[50,57]
Se ha observado que la larva infectante
como [39]
y en especial la Hsp70 es
de a
T.
spirals
peróxido
cuando
La
expuesta
de
la
(H2O2) y frío, expresa la Hsp50,
es
hidrógeno [58]
y al
comparación de los niveles de Hsp
ser expuesta a peroxido de hidrógeno al
puede ser realizada para todos los
1% y 2% se provoca un incremento de
organismos
las Hsp60, 70 y 90.
y
tejidos
de
donde
se
[59]
Cuando T.
puedan obtener biopsias. Esto permitirá
spiralis
el diagnóstico del daño producido por el
sobreexpresa la Hsp70, sin cambios en
estrés en el tejido, y en particular
la
durante
la
infección,
pero
también
es
expresión
expuesta de
la
disminución de la Hsp90
permitirá el monitoreo de la progresión
a
Hsp60
4°C, y
una
[60]
. Cuando T.
spiralis es tratada con antihelmínticos,
5
Archivos de Medicina © http://archivosdemedicina.com no se han observado cambios en la
utilizaron ratas Long Evans hembras
expresión de las Hsp60, 70 y 90, salvo
con una edad promedio de dos meses y
para
su
medio, con un peso aproximado de 250
expresión cuando T. spiralis es tratada
gramos. Cada animal fue infectado con
la
Hsp50
con mebendazol.
que
disminuye
[59]
500 LI de T. spiralis por vía oral (trozo de carne infectada)(Xenodiagnóstico).
Por lo anterior, es importante investigar
los
mecanismos
Los
de
animales
se
mantuvieron
en
adaptación del nematodo T. spiralis,
condiciones normales de bioterio.
debido a que puede infectar a un
Obtención de LI por la Técnica de
número variado de huéspedes, por lo
Digestión Artificial: Las LI viables se
que el estudio fisiológico-adaptativo de
obtuvieron del músculo de ratas Long
T. spiralis puede proveer información
Evans infectadas con T. spiralis por seis
sobre los mecanismos que ayudan al
semanas, las cuales al sacrificarlas, se
establecimiento y permanencia de la
obtuvo
el
enfermedad causada por este parásito.
molido
(pierna,
tejido
muscular masetero,
que
fue
lengua,
se
diafragma e intercostales). Se pesaron
determinó, cuales son las Hsp que
60 gramos de carne y se colocaron en
expresa el nematodo T. spiralis, que le
un costal de tela de tul, el cual se
permiten
diferentes
introdujo en un embudo de separación
cambios como son temperatura y pH
para ser sometida a digestión con jugo
durante el proceso de implante en un
gástrico artificial, preparado con 1 litro
huésped y así causar enfermedad.
de agua destilada conteniendo pepsina
En
el
presente
adaptarse
estudio
a
fue:
a una concentración de 10,000 U, 3%
las
de HCL 0.2 N (pepsina 3.5 grs. más 7
proteínas Hsp25, 60, 70 y 90 cuando el
ml de HCL), teniéndolo en incubación
nematodo T. spiralis es sometido a
por 24 horas a 37º C para después
diferente temperatura (40, 21, 4, 0. –
recolectar el paquete larvario, mismo
20, -50°C) y diferente pH (2, 3, 4, 5, 7,
que fue resuspendido en una solución
8, 9).
amortiguadora de fosfatos (PBS; pH de
El
objetivo
determinar
la
del
trabajo
expresión
de
7.2) (Gibco BRL, Grand Island NY, USA, [61]
Material y métodos
21300-58).
Lugar de realización del trabajo: El
Inducción
trabajo se llevó a cabo en el Laboratorio
larvario se dividió en 14 partes iguales,
de
1 como control, 6 fueron
Biología
Celular
de
la
Unidad
de
estrés:
El
paquete
sometidas a
Académica de Biología Experimental de
diferentes temperaturas (-50, -20, 0, 4,
la Universidad Autónoma de Zacatecas.
21, 40°C) en medio de cultivo RPMI
Nematodos
Para
(Gibco BRL, Grand Island NY, USA,
mantener la cepa de T. spiralis, se
11875-093), y las otras 7 se estresaron
de
T.
spiralis.
6
Archivos de Medicina © http://archivosdemedicina.com con jugo gástrico artificial a diferente
proteínas Hsp25, 60, 70 y 90 (Sigma
pH (2, 3, 4, 5, 7, 8, 9) todos a un
Chemical Co, St Louis MO, USA, I-1395,
tiempo de 3 horas y a 37°C.
T-6674,
Lisis de los nematodos y PAGE-SDS:
dilución 1:1000. Un anticuerpo anti-IgG
Los nematodos de T. spiralis sometidos
de
a estrés a diferente temperatura y
(Sigma Chemical Co, St Louis MO, USA,
diferente pH, se lavaron 3 veces con
A-9044)
solución de fosfatos salinos (PBS; pH de
como segundo anticuerpo, seguido por
7.2) (Gibco BRL, Grand Island NY, USA,
un
21300-058), se le añadió 1 ml. de
quimioluminiscente
buffer de lisis que contiene: Triton X-
Amersham,
100 al 1%, NaCl 140 mM, EDTA 1 mM,
Buckinghamshire,
Tris-HCl 10 mM pH 7.6 e inhibidor de
detectado en una película radiográfica
proteasas
(Sigma
BioMax (Eastman Kodak Co, Rochester,
Chemical Co, St Louis MO, USA, P-
NY, USA, 870-1302) en un tiempo de 1
7626). En frío, las larvas en el buffer de
minuto.
lisis se homogenizaron en un mortero.
Determinación de la cantidad de Hsp:
El lisado se centrifugó por 10 minutos a
Las autorradiografías obtenidas por el
1600
método
1
g
mM,
y
el
recuperado
y
PMSF
sobrenadante
conjugado dilución
con
a
peroxidasa
1:1500,
sistema
es
ECL
usado
de
detección
(ECL,
RPN2106,
Little
de
una
Chalfont,
England),
se
que
analizaron
fue
por
densitometría (Eagle Eye, Estratagene
La
Mitsubishi), con el fin de cuantificar la
cuantificación de proteína se realizó
cantidad de proteína. El valor de 21°C
mediante
por
fue tomado como condición control de
. De cada condición
temperatura y 7 el valor control de pH
de
la
determinó
ratón
H-5147)
la
concentración
se
fue
H-4149,
proteínas.
técnica
Bradford (1976)
[62]
descrita
[63]
experimental, 30 μg de proteína se
(valor neutro).
caracterizaron
Inmunofluorescencia:
en
geles
de
obtenidas
acuerdo
sometidas a diferente temperatura y
la
técnica
Laemmli (1970). Western
Blot
descrita
por
[64]
y
pH, se lavaron análisis:
bloqueadas
Las
con
digestión
larvas
poliacrilamida (PAGE-SDS al 12.5%) de a
por
Las
artificial
y
5 veces con PBS, suero
fetal
bovino
proteínas en los geles de poliacrilamida-
(SFB) al 3% en PBS por 30 minutos e
SDS fueron transferidas a papel de
incubadas por 1 hora con anticuerpos
nitrocelulosa (Amersham Laboratories,
específicos contra las Hsp25, 60, 70 y
Buckinghamshire, England, RPN303C),
90 (I-1395, T-6674, H-4149, H-5147,
[65]
Sigma Chemical Co, St Louis MO.)
Después, para identificar a las proteínas
diluidos a 1:500 en 3% de SFB-PB.
Hsp, el blot fue tratado con anticuerpos
Después del lavado, la incubación del
monoclonales
primer anticuerpo es seguido por el
como
describió
Towbin
específicos
(1979).
contra
las
7
Archivos de Medicina © http://archivosdemedicina.com segundo anticuerpo (1:100, F-9137:
proceso de implante en un huésped,
FITC
causando enfermedad,
sheep
anti-mouse;
Sigma
Chemical Co., St Louis MO.) por 1 hora
objetivo
a temperatura ambiente. Después de 5
determinar el grado de expresión de las
lavados con PBS, las larvas fueron
proteínas Hsp25, 60, 70 y 90 cuando el
colocadas en portaobjetos, se les colocó
nematodo T. spiralis es sometido a
un cubreobjetos y se analizaron por
diferente temperatura (40, 21, 4, 0. –
microscopía
20, -50°C) y diferente pH (2, 3, 4, 5, 7,
confocal
(Carl
Zeiss,
del
por lo que el
presente
trabajo
fue:
Axiovert 200M).
8, 9). El analizar cambios en el pH es
Análisis estadístico: Las bandas de
debido a que en el tejido infectado se
proteína Hsp25, 60, 70 y 90 obtenidas
tiene un pH y al ser ingerido por un
bajo las condiciones de estrés por
huésped a lo largo del tracto digestivo
temperatura
se presentan diferentes pH.
analizadas
y
pH
por
que
fueron
densitometría,
los
Al analizar por Western blot a las
resultados obtenidos fueron expresados
proteínas
como media ± s.e.m., donde n es el
spiralis a temperatura ambiente (21°C),
número de observaciones.
encontramos que expresa en mayor
Hsp
constitutivas
de
T.
proporción la Hsp25, le sigue la Hsp90, y en menor cantidad la Hsp70. Es
Discusión las
normal haber encontrado la expresión
larvas infectantes de T. spiralis fueron
de algún miembro de la familia de las
expuestas
estresores,
Hsp en T. spiralis, ya que se conoce que
simulando los impuestos por el mismo
se expresan prácticamente en todas las
huésped o bien, por el manejo de la
células vivas, tanto procariotas como
carne desde el sacrificio de un animal
eucariotas
infectado hasta su almacenamiento. Lo
esenciales
anterior se justifica debido a que T.
desarrollo normal como es el plegado
spiralis sobrevive a cambios adversos
correcto
de temperatura por almacenamiento o
síntesis,
cocción, y variaciones en el pH durante
compartimiento
el paso por tracto digestivo de un
ayudar en la degradación de proteínas
huésped, y así causar enfermedad.
entre otras funciones.
En
En
nuestra a
investigación,
varios
el
presente
estudio
las
proteínas
de
esta
se
y
que bajo
de
tienen
condiciones
proteínas
de
durante
su
de
un
transportar
condición
funciones
subcelular
a
otro
[9,13,14,15,66]
experimental,
y
Bajo
no
se
choque
encontró la expresión de la Hsp27 y 60.
calórico (Hsp) que expresa el nematodo
La localización de las Hsp25, 70
T. spiralis, y que de manera fisiológica
y 90 analizada por inmunofluorescencia
le permiten adaptarse a cambios como
utilizando microscopía confocal, fue de
son
manera
analizaron
temperatura
y
pH
durante
el
8
homogénea
en
esófago,
Archivos de Medicina © http://archivosdemedicina.com cavidad celómica y cutícula para la
desnaturalizadas,
Hsp25; la localización de Hsp70 fue
agregados de proteínas.
homogénea principalmente en esófago
fue la primera proteína observada como
y cutícula; y la Hsp90 la encontramos
inducible por estresores como el calor
homogénea principalmente en cavidad
entre
celómica.
encontrado
Al
estresar
diferentes
T.
temperaturas
spiralis y
y
[13]
otros.
que
disociando [13,14]
La Hsp70
Además, durante
se
el
ha
choque
térmico se protege selectivamente a las
a
mitocondrias
analizar
con
una
correlación
cambios en la expresión de las Hsp,
estrecha entre el grado de protección
encontramos que existe un incremento
mitocondrial
de la Hsp25 conforme T. spiralis se
Hsp70.
somete a bajas temperaturas (4, 0, -
confirmada
20, -50), en cambio a altas (40°C), se
choque térmico previo a una perfusión
reduce
cardiaca con peróxido de hidrógeno,
su
expresión.
corresponde
con
Lo
lo
anterior
reportado
en
donde
organismos multicelulares, donde las que
más
se
induce
la
[69]
concentración
Esta en
protección
ratas
provocó
aumento
En
su
el
de es
expuestas
concentración de Hsp70.
smHsp son las proteínas de estrés calórico
y
en
a
la
[36]
presente
estudio,
el
de
Hsp90
es
comportamiento
la
expresión por condiciones estresantes,
sobreexpresarse ya sea por frío o por
pero
la
calor, y entre sus funciones se ha
el
encontrado que ayuda a prevenir el
estrés,
agrupamiento de otras proteínas que
también
expresión
están
sujetas
regulada
desarrollo
en
a
durante
ausencia
de
demostrado en estudios de Drosophila.
están
[67]
incrementos en la temperatura u otro En
el
presente
estudio,
desplegadas
debido
a
tipo de estresor, también se asocia a
la
sobreexpresión de la Hsp70 se da por
componentes
calor (40°C) o por frío (-50°C). Se ha
receptores de hormonas esteroideas,
reportado que la Hsp70 se encuentra en
[70]
todos los organismos estudiados, desde
la regulación de enzimas y trascripción
bacterias,
de proteínas dentro de la célula.
levaduras
y
el
hombre,
celulares
como
los
así mismo juega un papel crucial en [71]
localizadas de manera ubicua en las
Uno
células, cuya función principal es en el
relevantes
transporte
proteínas
investigación fue que bajo la condición
[68]
experimental de –50°C, aparece la
Durante el estrés por calor u otro tipo
expresión de la Hsp60. Mencionamos
de estresores, la Hsp70 es una proteína
antes el papel que juegan la Hsp70 y
inducible, ayudando al plegado correcto
Hsp90 en el doblado de proteínas en
de
células sometidas a estrés, lo que
desdobladas
y
la y
unión su
proteínas
a
corrección.
parcialmente
9
de
los de
hallazgos la
mas
presente
Archivos de Medicina © http://archivosdemedicina.com junto con la expresión de la Hsp60 y
como básico, mientras que la Hsp90
la Hsp10, ayuda bajo las mismas
solamente se sobreexpresa a un pH
condiciones a la supervivencia celular,
ácido y disminuye su expresión a un pH
ya que funciona como chaperona que
básico. La distribución de las Hsp bajo
facilita el doblado y renaturalización
las condiciones estresantes de pH es a
de proteínas en células sometidas a
lo largo de todo el nematodo similar a
estrés, así mismo, su función a nivel
la encontrada a temperatura ambiente
mitocondrial es en el transporte de
de 21°C.
proteínas, en donde la Hsp60 y Hsp70
Podemos
concluir,
que
los
facilitan el tráfico bidireccional entre
nematodos
la mitocondria y el citoplasma, sin
bruscos de temperatura y pH ayudados
dejar de mencionar su función en la
por la expresión de cuatro proteínas del
respuesta inmune, ya que la Hsp60
estrés calórico, la Hsp25, 60, 70 y 90, y
tiene propiedades inmunodominantes,
otras proteínas aún no caracterizadas.
[67]
sobreviven
a
cambios
siendo todas estas características
Es importante hacer un análisis
un punto importante en la ayuda para
más profundo sobre los mecanismos
contrarrestar el estrés.
que utiliza T. spiralis para implantarse
La expresión de las Hsp por
en un huésped y causar enfermedad.
cambios de temperatura fue analizado
Los
por
nuestro
inmunofluorescencia
utilizando
aspectos
más
estudio,
es
importantes acerca
de
de la
microscopía confocal, con el propósito
supervivencia
de analizar posibles cambios en la
temperaturas extremas y a cambios en
localización de las Hsp en T. spiralis.
el pH.
En
general,
se
encontró
que
la
Es
del
crucial
nematodo
seguir
a
estudiando
localización de la Hsp es homogénea
sobre los mecanismos de adaptación y
en
y
supervivencia de este nematodo debido
cutícula cuando tenemos temperatura
a la expresión y sobreexpresión de las
de 21°C, y conforme se disminuye la
proteínas de estrés calórico, así como
temperatura, este patrón llega a ser a
analizar la variación de estas proteínas
lo
durante
esófago,
largo
cavidad
del
parásito
celómica
de
manera
homogénea, difusa y de puntilleo.
diferentes
preacondicionamiento
procesos a
de
estresores
por
como la temperatura y variaciones en el
Western blot la expresión de las Hsp
pH, junto o en paralelo con los de
cuando
evasión de la respuesta inmune del
Así
diferente
mismo,
T.
al
spiralis
pH,
es
analizar sometida
encontramos
que
a
huésped.
las
Hsp25, 70 y 90 se expresan a diferente pH,
donde
las
Hsp25
y
70
se
Agradecimientos
sobreexpresan a un pH tanto ácido
10
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