Universidad Nacional de la Patagonia San Juan Bosco

Universidad Nacional de la Patagonia San Juan Bosco FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Programa del Curso: Técnicas de estudio aplicadas en Helmintología...
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Universidad Nacional de la Patagonia San Juan Bosco FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Programa del Curso: Técnicas

de estudio aplicadas en Helmintología

Animal Sede: Puerto Madryn Profesores: Dra. Florencia Cremonte (CENPAT-CONICET; UNPSJB), Dra. Carmen Gilardoni (CENPATCONICET; UNPSJB). Colaboradores: Lic. Estefanía Bagnato (CENPAT-CONICET), Dra. Cintia Medina (CENPAT-CONICET), Lic. Marcelo Santo (CENPAT-CONICET) Carga Horaria: 40 hrs Total

Sem. Teóricos

Total Teóricos

40

20

Sem. Prácticos

Total Prácticos

Sem. Teórico/Práct.

Total Teórico/Práct.

20

Clases Teóricas /Prácticas Días: Lunes a Viernes

de 8 a 12 hs y de 14 a 18 hs

I. Objetivos de la Asignatura: Brindar conceptos teóricos sobre parasitología animal y herramientas en los que respecta a técnicas de estudio en la disciplina. Se pretende lograr la sistematización de los conocimientos en torno a la morfología, biología y ecología de los helmintos, como así también en los roles que cumplen los diferentes grupos parásitos dentro de las comunidades que conforman. Las actividades prácticas pretenden desarrollar las habilidades para la colecta de especímenes, el modo de preservación, la preparación para su estudio mediante la aplicación de distintas técnicas (in vivo, tinciones y preparaciones permanentes, diafanización, histología, microscopía electrónica, técnicas moleculares) y la determinación taxonómica, utilizando herramientas como son los microscopios estereoscópico y óptico y la utilización de bibliografía especializada incluyendo claves taxonómicas. II. 1 Contenidos Mínimos: Introducción a la Parasitología. Ecología de poblaciones y comunidades. Macroparásitos: generalidades morfología, reproducción y ciclos de vida. Platelmintos (turbelarios, monogeneos, digeneos y cestodes), nematodes y acantocéfalos. Técnicas de estudio: estudio en vivo, preservación y fijación, tinciones, preparados permanentes, cortes histológicos. Uso de las herramientas moleculares en el estudio de los Helmintos. II. 2 Programa Analítico:

TEÓRICOS

UNIDAD 1. Introducción a la Parasitología. Concepto de parasitismo. Tipos de parásitos (ecto y endoparásitos, macro y microparásitos). Tipos de hospedadores (definitivos, intermediarios, paraténicos, accidentales, aberrantes, etc.). Ciclos de vida: monoxenos (directos) y heteroxenos (indirectos).

Año de Vigencia

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Animal Sede: Puerto Madryn UNIDAD 2. Ecología de poblaciones y comunidades. Términos ecológicos: prevalencia, incidencia, intensidad, intensidad media, densidad, densidad relativa o abundancia, infrapoblación, suprapoblación, infracomunidad, supracomunidad, comunidad componente. Muestreo y toma de datos. Aplicaciones de estadística no paramétrica y Modelos Lineales Generalizados (GLMs). Tipos de comunidades parásitas, descripción y cuantificación. Índices de diversidad, riqueza y equitatividad.

UNIDAD 3. Macroparásitos I. Phylum Plathelminthes. Diversas clasificaciones. Caracteres diagnósticos y generalidades del grupo. Turbellaria. Trematoda. Digenea. Reproducción asexual y sexual, desarrollo. Ciclos de vida. Estadios larvales: miracidio, esporoquiste, redia, cercaria y metacercaria. Clasificación de las cercarias y tipos de adultos. Progénesis. Especies de importancia zoonótica en Argentina y Latinoamérica.

UNIDAD 4. Macroparásitos II. Trematoda. Monogenea. Morfología externa e interna. Larvas y desarrollo postlarval. Ejemplos. Especies de importancia sanitaria. Ciclos de vida.

UNIDAD 5. Macroparásitos III. Cestoidea: morfología, sistemática y biología. Eucestoda y Cestodaria. Adaptaciones de los ciclos de vida acuáticos y terrestres: estadios larvales y huevos. Especies de importancia zoonótica en Argentina y Latinoamérica.

UNIDAD 6. Macroparásitos IV. Acanthocephala. Morfología externa e interna. Reproducción. Estadios larvales. Ciclos de vida. Especies de importancia zoonótica en Argentina y Latinoamérica.

UNIDAD 7. Macroparásitos V. Nematoda. Diversas clasificaciones. Caracteres diagnósticos y generalidades del grupo. Morfología externa e interna. Reproducción. Estados larvales. Ciclos de vida. Diversidad. Especies de importancia zoonótica en Argentina y Latinoamérica.

UNIDAD 8. Uso de las herramientas moleculares en el estudio de los helmintos. Técnicas básicas: métodos de extracción y purificación de ADN, reacción en cadena de la polimerasa (PCR), clonado de genes, análisis y secuenciación de ADN, alineamiento y análisis de secuencias. Genes utilizados en parasitología (ADN ribosomal y ADN mitocondrial) para dilucidar ciclos de vida, diferencias entre especies y en filogenia.

TRABAJOS PRACTICOS

TP 1: Disección de peces, crustáceos y moluscos. Emisión de cercarias. Identificación de parásitos, estudio en vivo con colorantes vitales. Colecta y fijación de helmintos utilizando distintas técnicas (formol 5% y AFA para Año de Vigencia

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Animal Sede: Puerto Madryn tinción de platelmintos, alcohol absoluto para análisis moleculares, glutaraldehído para microscopía electrónica, Bouin para histología, etc.). Rotulado y preservación. Tinciones: carmín, tricrómico de Gomori, otras. Diafanización de nematodes (lactofenol, glicerina-alcohol, ácido láctico). Montaje: preparación de preparados temporarios y permanentes.

TP 2. Técnica histológica: deshidratación, inclusión en parafina y resina, armado de tacos, cortes de secciones histológicas con micrótomo, tinciones y montaje. Fijación y montaje para MEB (Microscopía Electrónica de Barrido) y MET (Microscopía Electrónica de Transmisión). TP 3. Observación de preparados definitivos y cortes histológicos en el Microscopio óptico. Utilización de la cámara clara y portaobjeto graduado. Reconocimiento de grupos taxonómicos (larvas y adultos) utilizando claves y bibliografía especializada. TP 4. Análisis coproparasitológicos de heces caninas mediante técnicas de flotación y sedimentación. Observación microscópica, detección y reconocimiento de huevos y quistes de protozoos.

TP 5. Métodos aplicados al estudio de ciclos de vida. Infección experimental de segundos hospedadores intermediarios y hospedadores definitivos. Cultivo in vitro de metacercarias. Análisis moleculares: extracción de ADN, PCR, corrida de los productos PCR en geles de agarosa y observación de geles). IV. Bibliografía Acha PN, Szyfres B. 2003. Zoonosis y enfermedades transmisibles comunes al hombre y a los animales. Salud OPdl, editor. Washington: Organización Panamericana de la Salud. 989 p. Anderson RC. 2000. Nematode parasites of vertebrates: their development and transmission: CAB International. 578 p. Bray R, Gibson D, Jones A. 2008. Key to the Trematoda. Volume 3. London, UK: CAB International and Natural History Museum. 807 p. Bush AO, Lafferty KD, Lotz JM, Shostak AW. 1997. Parasitology meets ecology on its own terms: Margolis et al. revisited. Journal of Parasitology 83(4):575-583. Caspeta-Mandujano JM. 2005. Nematode parasites of freshwater fish in Mexico: key to species, descriptions and distribution. Cuernavaca Morelos, México: Universidad Autónoma del Estado de Morelos. 175 p. Carson S, Miller HB, Witherow DS. 2012. Molecular Biology Techniques (Third edition). San Diego: Academic Press. 232 p. Combes C. 2001. Parasitism. The ecology and evolution of intimate interactions. Thompson JN, editor: The University of Chicago. 728 p. Año de Vigencia

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Animal Sede: Puerto Madryn Eiras JC, Takemoto RM, Pavanelli GC. 2000. Métodos de estudo e técnicas laboratoriais em parasitologia de peixes. Editora da Universidade Estadual de Maringá. 171 pp. Fried B, Graczyk TK. 1997. Advances in Trematode Biology. Boca Raton. New York: CRC Press. 466 p. Howard DW, Lewis EJ, Keller BJ, Smith CS. 2004. Histological techniques for marine bivalve mollusks and crustaceans. Oxford: NOAA technical memorandum NOS NCCOS %. 218 p. García SL. 2001. Macroscopic and microscopic examination of fecal specimens. In: Associates LSG, editor. Diagnostic Medical Parasitology. Washington D.C. : ASM Press. p 741-828. Galaktionov KV, Dobrovolskij AA. 2003. The biology and evolution of Trematodes. The Netherlands: Kluwer. 592 p. Gibson D, Jones A, Bray R. 2002. Key to the Trematoda. Volume 1. London, UK: CAB International and Natural History Museum. 521 p. Goater TM, Goater CP, Esch GW. 2014. Parasitism: the diversity and ecology of animal parasites. Cambridge TPSotUo, editor. Cambridge: Cambridge University Press. 466 p. Jones A, Bray R, GIbson D. 2005. Key to the Trematoda. Volume 2. London, UK: CAB International and Natural History Museum. 745 p. Khalil LF, Jones A, Bray RA. 1994. Key to the Cestode Parasite of Vertebrates. Khalil LF, editor: CAB International. 751 p. Kohn A, Cohen S, Salgado-Maldonado G. 2006. Checklist of Monogenea parasites of freshwater and marine fishes, amphibians and reptiles from Mexico, Central America and Caribbean. Zootaxa 1289:1-114. Kohn A, Fernandez BMM, Cohen SC. 2007. South American Trematodes parasites of fishes. Rio de Janeiro: Ministério da Saúde, FIOCRUZ, Fundacao Oswaldo Cruz. 318 p. Kinne O. 1980. Diseases of marine animals. Volumen I. General Aspects, Protozoa to Gastropoda. Chichester, New York, Brisbane, Toronto: The Pitman Press. 466 p. Kinne O. 1983. Diseases of Marine Animals. Volume II. Introduction, Bivalvia to Scaphopoda. Hamburg: Westholsteinische Verlagsdruckerei Boyen & Co. 581 p. Kinne O. 1990. Diseases of Marine Animals. Volume III. Introduction. Cephalopoda, Annelida, Crustacea, Chaetognatha, Echinodermata, Urochordata. Hamburg: Westholsteinische Verlagsdruckerei Boyen & Co. 696 p. Lunaschi LI, Cremonte F, Drago FB. 2007. Checklist of digenean parasites of birds from Argentina. Zootaxa 1403:1-36. Lunaschi LI, Drago FB. 2007. Checklist of digenean parasites of amphibians and reptiles from Argentina. Zootaxa 1476:51-68. Lunaschi LI, Drago FB. 2007. Checklist of digenean parasites of wild mammals from Argentina. Zootaxa 1580:35-50. Año de Vigencia

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Animal Sede: Puerto Madryn Marr JJ, Müller M. 1995. Biochemistry and Molecular Biology of Parasites. London: Academic Press Limited. 349 p. Morales G, Pino LA. 1987. Parasitología cuantitativa. Venezolana FEAC, editor. Caracas: Fondo Editorial Acta Científica Venezolana. 131 p. Poulin R, Moran S. 2004. Parasite Biodiversity. Washington D.C.: Smithsonian Institution Books. 216 p. Pritchard MH, Kruse GOW. 1982. The collection and preservation of animal parasites. Nebraska: University of Nebraska Press. 141 p. Rego AA, Chubb JC, Pavanelli GC. 1999. Cestodes in South American freshwater teleost fishes: keys to genera and brief description of species Revista brasilera de Zoologia 16:299-367. Rohde K. 1993. Ecology of marine parasites an introduction to marine parasitology. International C, editor. Bristol: Redwood Books. 298 p. Schmidt G, Hugghins E. 1973. Acanthocephala of South America fishes. Part 2. Palaeacanthocephala. Journal of Parasitology 59:836-838. Schmidt G, Hugghins E. 1973. Acanthocephala of South America fishes. Part 1. Eoacanthocephala. Journal of Parasitology 59:829-835. Siegel S. 1990. Estadística no paramétrica aplicada a ciencias de la conducta. México: Editorial Trillas. 344 p. Thienpont D, Rochette F, Vanparijs OFJ. 1979. Diagnóstico de las helmintiasis por medio del examen coproparasitológico: Janssen Research Foundation. 187 p. Wisnivesky C. 2003. Ecología y epidemiología de las infecciones parasitarias: Libro Universitario Regional de la Asociación de Editoriales Universitarias de América Latina y Caribe. 400 p. Yamaguti S. 1971. Synopsis of digenetic trematodes of vertebrates. Tokyo: Keigaku Publishing Co. 1074 p. Yamaguti S. 1975. A synoptical review of life histories of digenetic trematodes of vertebrates with special reference to the morphology of their larval forms. Keigaku Publishing Co Tokyo: 1-575 p. Zdzitowiecki K. 1997. Antarctic Digenea, parasites of fishes. Wägele JW, Sieg J, editors. Königstein: Koeltscientific books. 156 p. V. Metodología de Enseñanza: El programa del curso de postgrado está conformado por 8 unidades repartidas en 5 clases teóricas y 5 prácticas. Las clases teóricas se impartirán mediante la exposición de diapositivas Power Point con texto, gráficos e imágenes ilustrativas, promoviendo la participación de los alumnos en todo momento. Los trabajos prácticos se realizarán al finalizar las unidades teóricas pertinentes, por la tarde. Los trabajos prácticos consisten principalmente en la observación de material (preferentemente en vivo) utilizando microscopios, estereoscópicos y ópticos, lo cual conlleva al aprendizaje de dichas herramientas, que incluyen el uso de la cámara clara (dibujo del preparado al microscopio), contraste de interferencia diferencial DIC Nomarsky y Año de Vigencia

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Animal Sede: Puerto Madryn toma de fotografías digitales. Asimismo, se realizarán disecciones de pescados frescos, moluscos y crustáceos y prácticas de distintas técnicas (histológica con parafina y resina, molecular, preparaciones temporarias y permanentes, tinciones, etc.), utilizando los laboratorios de Parasitología, de Histología y de Biología Molecular, así como la sala de óptica, aprendiendo a utilizar todos el instrumental que se necesita para la aplicación de las herramientas de investigación.

VI. Condiciones para la aprobación del cursado de la asignatura: Haber asistido al 100% de las clases. Aprobar la evaluación final.

Vigencia de este programa

Año 2017

Firma

Profesor responsable Dra. Florencia Cremonte

2017

Dra. Carmen Gilardoni

Visado Decano

Fecha

Año de Vigencia

Sec. Investigación y Posgrado Facultad

Fecha

2017

Director Carrera Posgrado

Fecha

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