1

UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE FACULDADE DE VETERINÁRIA PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM MEDICINA VETERINÁRIA DOUTORADO EM HIGIENE VETERINÁRIA E PROCESSAMENTO TECNOLÓGICO DE PRODUTOS DE ORIGEM ANIMAL

FABIO MACEDO DA COSTA

DESENVOLVIMENTO, VALIDAÇÃO E APLICAÇÃO DE METODOLOGIA ANALÍTICA PARA DETERMINAÇÃO DE RESÍDUOS DE LACTONAS MACROCÍCLICAS EM MANTEIGA

NITERÓI, RJ 2015

2

FABIO MACEDO DA COSTA

DESENVOLVIMENTO, VALIDAÇÃO E APLICAÇÃO DE METODOLOGIA ANALÍTICA PARA DETERMINAÇÃO DE RESÍDUOS DE LACTONAS MACROCÍCLICAS EM MANTEIGA

Tese apresentada ao Programa de Pósgraduação em Medicina Veterinária da Universidade Federal Fluminense, como requisito parcial para obtenção do Grau de Doutor. Área de Concentração: Higiene Veterinária e Processamento Tecnológico de Produtos de Origem Animal.

Orientadora: Profª. Dra. ELIANE TEIXEIRA MÁRSICO Coorientador: Prof. Dr. ANNIBAL DUARTE PEREIRA NETTO

NITERÓI, RJ 2015

3

C837d

Costa, Fabio Macedo da Desenvolvimento, validação e aplicação de metodologia analítica para determinação de resíduos de lactonas macrocíclicas em manteiga / Fabio Macedo da Costa; orientadora Eliane Teixeira Mársico. — 2015.

140 f. Tese (Doutorado em Higiene Veterinária e Processamento Tecnológico de Produtos de Origem Animal) – Universidade Federal Fluminense, 2015. Orientadora: Eliane Teixeira Mársico 1. Manteiga. 2. Análise de alimentos. 3. Lactonas. 4. Produto lácteo. 5. Resíduo de medicamento. I. Título.

CDD 637.1276

4

FABIO MACEDO DA COSTA DESENVOLVIMENTO, VALIDAÇÃO E APLICAÇÃO DE METODOLOGIA ANALÍTICA PARA DETERMINAÇÃO DE RESÍDUOS DE LACTONAS MACROCÍCLICAS EM MANTEIGA

Tese apresentada ao Programa de Pósgraduação em Medicina Veterinária da Universidade Federal Fluminense, como requisito parcial para obtenção do Grau de Doutor. Área de Concentração: Higiene Veterinária e Processamento Tecnológico de Produtos de Origem Animal. Aprovado em 27 de Fevereiro de 2015

Niterói, RJ 2015

5

AGRADECIMENTOS

Agradeço a Deus, por ter me permitido chegar até aqui.

Agradeço aos meus orientadores, Professores Annibal Duarte Pereira Netto e Eliane Teixeira Mársico pelo acompanhamento de minha trajetória profissional desde o início de minha graduação, e pela fundamental orientação nesse importante projeto.

Agradeço aos membros da Banca Examinadora pela presteza em participar e contribuir com esse trabalho, em época tão atípica.

Agradeço em especial a Bernardete Ferraz Spisso, grande motivadora para essa caminhada.

Agradeço aos inúmeros amigos, colegas, e pessoas que agora nem teria condições de listar, e que a cada dia renovaram meu ânimo e inspiraram a confiança necessária para seguir.

Agradeço a CAPES pela contribuição financeira para a realização deste projeto.

6

RESUMO

Lactonas macrocíclicas (LM) são uma família de substâncias comumente utilizadas em formulações de medicamentos para o tratamento de parasitas em espécies animais criadas para produção de alimentos. No Brasil, com exceção de formulações com efeitos a longo prazo (longa meia-vida), as LM estão registradas para uso em bovinos. Devido às suas propriedades lipofílicas e notável estabilidade, o uso indiscriminado de LM pode resultar na presença de resíduos no leite e produtos lácteos. Um método analítico foi desenvolvido e validado para a determinação simultânea de quatro LM (abamectina (ABA), doramectina (DOR), ivermectina (IVM) e moxidectina (MOX)) em manteiga, utilizando cromatografia a líquido com detecção por fluorescência. O método envolveu extração líquido-líquido sob aquecimento e uma mistura de acetonitrila, acetato de etila e água, com préconcentração e derivatização, para produzir derivados fluorescentes estáveis. O tempo de corrida cromatográfica foi