una aventura… fetal
BANCO DE TEJIDOS FETALES
Joan Carles Ferreres, Núria Camats, Berta Domínguez, Francesc Borràs, Teresa Vendrell, Elena Carreras, M. Angeles Sánchez, Núria Torán Comité científico del BTF-HUVH. Servicios de Anatomía Patológica, Obstetricia y Unidad de Genética. HUVH. UAB
Curso de Primavera “Macroscopía: el arte del Tallado”, SEAP, 2010
antecedentes
z solicitud de tejido fetal a los patólogos que tenemos
acceso a este tipo de muestras z necesidad de regulación (consentimiento informado /
CEIC / estructura de banco de tejidos) z disponibilidad de este tipo de muestras
el proyecto: la oportunidad z HUVH: z aproximadamente 150 ILEs/año de fetos de entre 18-
22 semanas de gestación z aproximadamente 180-200 ILEs/año de fetos de menos de 16-17 semanas, obtenidos mediante legrado obstétrico z posibilidad de establecer un circuito de obtención rápida de las muestras (1 hora) z planteamiento como proyecto de investigación z posibilidad de contratar un becario
trabajo colaborativo z
Servicio de Obstetricia z diagnóstico prenatal z selección de los casos z práctica de la ILE
z
Unidad de Genética Clínica z soporte al diagnóstico
z
z
BTF z registro z almacenamiento z extracción de ADN z control de calidad
Servicio de Anatomía Patológica z realización de la autopsia z diagnóstico z obtención de las muestras
z
articulación del funcionamento como Banco de Tejidos
¿qué se ha hecho? z
Redacción de un Reglamento de Funcionamento: Comité de Dirección y Comité Científico del BTF. Aprobación por parte de la Gerencia del HUVH z Integración dentro del Biobanco HUVH (2009) z
Desde 2003 recogida de material: z 25 40 muestras tisulares distintas en los fetos obtenidos mediante parto inducido / las muestras de tejidos que se reconocen macroscópicamente en el material de legrado obstétrico z
congelación en nitrógeno líquido isopentano
z
Criomoldes (OCT) tubos 1,5 ml
¿qué se está haciendo? z
Inclusión en el BTF de los casos que cumplen: ● consentimiento informado (para BTF y para autopsia) ● Autorización de estudio tisular de pérdidas gestacionales
“autorizo la recogida de tejidos y anejos para estudio terapéutico y genético” ● Tiempo de recogida de menos de 1 hora desde la expulsión ● No enfermedad infecciosa ● Percepción de que el material es idóneo: ● Aspecto macroscópico de diversos tejidos (SNC, hígado...)
marco legal Ley de despenalización del aborto (Ley Orgánica 9/95, de 5 de julio). z “para evitar un grave peligro para la vida o la salud física o psíquica de la
embarazada” z “que el embarazo sea consecuencia de un hecho constitutivo de delito de violación siempre que el aborto se practique dentro de las 12 primeras semanas de gestación y que el mencionado hecho hubiese sido denunciado.” z “que se presuma que el feto habrá de nacer con graves taras físicas o psíquicas, siempre que el aborto se practique dentro de las 22 primeras semanas de gestación”.
Ley de salud sexual y reproductiva y de la interrupción voluntaria del embarazo (Ley Orgánica 2/2010, de 3 de marzo) z “a petición de la embarazada durante las 14 primeras semanas” z “grave riesgo para la vida o la salud de la embarazada” dentro de las 22
semanas”. z “riesgo de graves anomalías en el feto” (hasta la 22 semana de gestación) z cuando se detecten anomalías incompatibles con la vida o cuando se detecte una enfermedad extremadamente grave e incurable en el feto (en cualquier momento de la gestación, cuando se realice el diagnóstico)
tipología de la ILE, ventajas e inconvenientes Realización de la ILE: 2 situaciones distintas Gestaciones de menos de 16-17 semanas de gestación: Legrado obstétrico Tiempo “0” controlado a efectos de demora en la recogida de muestras. Material habitualmente fragmentado. Reconocimiento de cantidad variable de tejidos Material obtenido en condiciones óptimas de preservación de ADN y ARN Cantidad limitada
tipología de la ILE, ventajas e inconvenientes Realización de la ILE: 2 situaciones distintas Gestaciones de entre 17 y 22 semanas de gestación: Inducción del parto (o excepcionalmente intervención cesárea) Inicio de la inducción aproximadamente a las 22 horas del día anterior Expulsión entre las 8-20 horas del día siguiente Tiempo “0” menos controlado. Únicamente tiempo desde la expulsión Abundante material con posibilidad de recogida de todo tipo de tejidos Mayor facilidad para conseguir tejidos “a demanda”
ILE y autopsia fetal Integración de la recogida de muestras en el acto médico de la autopsia fetal. z
La recogida de muestras no puede comprometer la calidad de la autopsia
z
La realización de la autopsia debe intentar no demorar la recogida de muestras para el BTF
Profesionales altamente especializados (equipo de patólogos pediátricos) Autopsia: elemento fundamental para corroborar los diagnósticos prenatales y elemento básico para realizar consejo genético a la pareja
aportación de la autopsia al BTF Registro del caso en una base de datos: z
Aspectos técnicos (fecha, hora, tiempo...) características de almacenamiento, localización de las muestras
z
Datos gestación
z
Tejidos congelados/caso
z
Codificación de diagnósticos principales y dx secundarios una vez realizado el informe de la autopsia (código SALUS)
La codificación de los diagnósticos autópsicos en la BD del banco aporta gran valor cualitativo a la hora de seleccionar los casos
tipos de muestras CÓDIGO
TEJIDO
CÓDIGO TEJIDO
AD
Adrenales
AO
Aorta
P
Pulmón
BA
Bazo
PD
Pulmón dcho
CA
Cartílago (rodilla)
PI
Pulmón Izq
CO
Corazón (ápex)
R
Riñón
CR
Cárdias
RD
Riñón dcho
OV, TE
Genitales
RI
Riñón izq
HI
Hígado
TI
Timo
HU
Hueso. (costillas)
TR
Tiroides
IN, ID, C1, C2, C3, C4 Intestino: delgado, colon
VU
Vejiga urinaria
MU
Músculo (psoas)
PC
Placenta
OJ
Globo ocular
CU
Cordón umbilical
PA
Páncreas
PL
Piel
tipos de muestras CÓDIGO
TEJIDO
S1
SNC. Corteza frontal. Primer corte (sin ventrículo)
S2
SNC. Corteza frontal. Con ventrículo.
S3
SNC. Núcleos basales
S4
SNC. Núcleos basales
S5
SNC. Corteza occipital. Con ventrículo.
S6
SNC. Corteza occipital. Primer corte (sin ventrículo)
S7
SNC. Cerebelo
S8
SNC. Tronco encefálico
S9
SNC. Cerebelo y tronco encefálico
S0
SNC (sin especificar)
SE
Corteza cerebral
DNA HI
Hígado. Muestra para extracción de DNA.
RNA HI
Hígado. Muestra para extracción de RNA.
RNA P
Pulmón. Muestra para extracción de RNA.
tipos de muestras CÓDIGO
TEJIDO
S1
SNC. Corteza frontal. Primer corte (sin ventrículo)
S2
SNC. Corteza frontal. Con ventrículo.
S3
SNC. Núcleos basales
S4
SNC. Núcleos basales
S5
SNC. Corteza occipital. Con ventrículo.
S6
SNC. Corteza occipital. Primer corte (sin ventrículo)
S7
SNC. Cerebelo
S8
SNC. Tronco encefálico
S9
Hasta 40 ymuestras tisulares SNC. Cerebelo tronco encefálico
S0
SNC
SE
Corteza cerebral
DNA HI
Hígado. Muestra para extracción de DNA.
RNA HI
Hígado. Muestra para extracción de RNA.
RNA P
Pulmón. Muestra para extracción de RNA.
diferentes por caso
Banco de Tejidos Fetales Año
Nº casos
Muestras
2004
167
3.385
2005
187
4.299
2006
184
4.527
2007 2008
135 123
3.746 3.892
2009
143
3.575
Total
939
23.424
Hasta 31/12/2009
Banco de Tejidos Fetales Legrados SG
Nº Casos *
8
2
9
7
SG
Nº Casos *
10
19
16
7
11
20
17
15
12
52
18
42
13
84
19
46
14
98
15
93
20
69
16
102
21
117
17
17
22
187
Totales
494
Totales
483
* Hasta 15/04/2010
Inducción parto
Banco de Tejidos Fetales Tipología de los casos Casos control:
Con patología:
ILE por causa materna
Alteración cromosómica
Cariotipo normal
Anomalía congénita
Ausencia de anomalías en la autopsia Selección de muestras según requerimientos del grupo investigador (edad gestacional, tejido, patología…) Posibilidad de obtener muestras “a demanda” de forma prospectiva
control de calidad del material
• Extracción de RNA de un 5-10% de los casos congelados y análisis de las diferentes subunidades 18S y 28S ribosomales. • Encuesta a receptores del material del BTF
Banco de Tejidos Fetales CASOS TOTALES (15-04-10)
Cardiopatías Alteraciones óseas
% respecto al total de casos
35,00 28,79
30,00
Alteraciones del SNC Alteraciones nefrourológicas Trisomía 21
25,00 20,02
20,00 Trisomía 18 15,00 10,00 5,00
12,38
11,56
Trisomía 13
8,15 2,37
4,85
3,51
4,95 1,03
Otras cromosomopatías Otras alteraciones
0,00
1 Diagnósticos
Evaluación morfológica normal
Banco de Tejidos Fetales CASOS TOTALES (15-04-10)
Cardiopatías Alteraciones óseas
% respecto al total de casos
35,00 28,79
30,00
Alteraciones del SNC
30.85 % Alteraciones nefrourológicas
25,00
Trisomía 21
20,02
20,00 Trisomía 18
15,00
12,38
11,56
10,00 5,00
Trisomía 13
8,15
2,37
4,95
4,85
3,51
1,03
Otras cromosomopatías Otras alteraciones
0,00
1 Diagnósticos
Evaluación morfológica normal
34.68 %
Banco de Tejidos Fetales Alteraciones cromosómicas (n=292) (15-04-10)
194 47 10 18 5 19
12 13 14
15 16 17 18 19
20
21
22
semanas de gestación
¿qué se ha hecho? z muestras de más de 950 fetos (8-22 semanas) z extracción de DNA en 288 casos z control de calidad de las muestras (RNA) z colaboración con 35 proyectos de investigación z suministro de aproximadamente 650 muestras
funcionamiento del BTF z circuito de solicitudes, de tramitación (Comité Científico –
CEIC), respuesta y convenio de colaboración con la “Fundació de Recerca Hospital Universitari Vall d’Hebron”
Solicitud Grupo de Investigación
Evaluación Comité Científico BTF
Estudio viabilidad técnica
Evaluación CEIC
Criterios: -Proyectos Nacionales -Proyectos evaluados -Proyectos investigadores HUVH
Cálculo costes Convenio colaboración Envio convenio y costes
Selección de muestras y envío BTF Firma convenio y aceptación costes
¿otras experiencias similares?
http://www.mrc.ac.uk/Ourresearch/Resourceservices/HDBR/Fetaltissuebank/index.htm
¿otras experiencias similares?
http://www.wellcome.ac.uk/Education-resources/Biomedicalresources/Tissues/WTX034931.htm
futuro
z selección de casos: z mantener un fondo estable de controles y casos con
patologías frecuentes z incorporar casos de patologías muy infrecuentes z incorporar casos de patologías “a demanda” en función de las solicitudes z hacer difusión de la existencia del BTF y de la forma de acceder al material (página web) z realizar estudios de investigación propios
z Contacto con el BTF:
[email protected] ¡muchas gracias!
